在分子生物學(xué)、臨床研究與精準(zhǔn)醫(yī)療逐漸深入發(fā)展的今天,實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)技術(shù)已成為核酸檢測、表達(dá)分析及基因變異研究的關(guān)鍵方法。Applied Biosystems 7500 系列,作為賽默飛旗下廣受歡迎的實(shí)時(shí)熒光定量PCR平臺,憑借其高穩(wěn)定性、良好通量、靈活的軟件平臺和出色的數(shù)據(jù)一致性,被全球眾多實(shí)驗(yàn)室廣泛采用。
7500系列包括兩種機(jī)型:標(biāo)準(zhǔn)版7500與7500 Fast型,分別面向常規(guī)通量與快速檢測需求,適用于多種樣本類型及實(shí)驗(yàn)場景,兼容多種熒光探針與反應(yīng)體系,是研究與診斷之間的重要橋梁。
Applied Biosystems 7500 系列基于傳統(tǒng)96孔反應(yīng)板設(shè)計(jì),支持標(biāo)準(zhǔn)0.2 mL孔板或八聯(lián)管。整機(jī)設(shè)計(jì)緊湊,集成光學(xué)檢測與溫控模塊,操作界面直觀,硬件結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)合理。
96孔熱循環(huán)模塊(標(biāo)準(zhǔn)或Fast)
精密溫控系統(tǒng)(Peltier固態(tài)冷卻)
五通道光學(xué)檢測系統(tǒng)
Windows操作平臺連接的軟件系統(tǒng)
通用PCR塑料耗材適配架
外接PC與軟件控制界面
通過結(jié)構(gòu)模塊化設(shè)計(jì),設(shè)備實(shí)現(xiàn)了快速升降溫、精準(zhǔn)熒光檢測與靈活數(shù)據(jù)分析的高度整合。
升溫速率為2.5°C/秒;
完整反應(yīng)周期約需2小時(shí);
適合對速度要求不高但對數(shù)據(jù)質(zhì)量要求較高的應(yīng)用;
多用于常規(guī)基因表達(dá)、微生物檢測、SNP分型等科研任務(wù)。
升溫速率提升至5°C/秒;
全程反應(yīng)時(shí)間可縮短至30-40分鐘;
適合時(shí)間敏感實(shí)驗(yàn)如臨床樣本快速篩查、病原快速診斷等;
支持Fast反應(yīng)耗材與Fast反應(yīng)試劑,需專門適配。
兩款設(shè)備在光學(xué)系統(tǒng)、數(shù)據(jù)分析能力和軟件平臺方面保持一致,均支持多重檢測及標(biāo)準(zhǔn)定量分析。
7500系列均配備5通道光學(xué)檢測系統(tǒng),采用獨(dú)立激發(fā)濾光片與發(fā)射濾光片組合,分別對應(yīng)多種常見熒光染料:
支持FAM、VIC、SYBR Green、ROX、TAMRA、NED、Cy5等染料;
通道之間無交叉干擾,適合多重?zé)晒夥磻?yīng);
光源為高亮度氙燈,配合高靈敏CCD攝像頭捕捉信號;
每個(gè)通道設(shè)定獨(dú)立校準(zhǔn)值,確保反應(yīng)線性范圍廣(10個(gè)數(shù)量級以上);
最低檢測靈敏度可達(dá)1-10個(gè)拷貝/μL。
系統(tǒng)經(jīng)過嚴(yán)格的工廠預(yù)校準(zhǔn),保證設(shè)備到達(dá)即用,無需額外光路調(diào)整。
高精度溫控是PCR反應(yīng)成敗的關(guān)鍵。7500系列的熱循環(huán)模塊采用高導(dǎo)熱Peltier熱電元件,實(shí)現(xiàn)快速升降溫與精準(zhǔn)溫度控制:
溫度精度 ±0.25°C;
熱蓋自動壓力調(diào)節(jié),適配不同耗材;
支持梯度設(shè)計(jì),便于引物退火溫度優(yōu)化;
均一性良好,邊緣效應(yīng)極低,實(shí)驗(yàn)重復(fù)性高。
Fast型號更在標(biāo)準(zhǔn)基礎(chǔ)上優(yōu)化加熱算法與模塊材料,提高整體實(shí)驗(yàn)通量與響應(yīng)速度。
賽默飛為7500系列配套開發(fā)了功能全面的分析軟件(7500 System SDS Software),適用于Windows環(huán)境,支持多種實(shí)驗(yàn)?zāi)J脚c分析方式:
實(shí)時(shí)數(shù)據(jù)監(jiān)控:可實(shí)時(shí)查看熒光曲線、熔解曲線與擴(kuò)增效率;
Ct值分析:系統(tǒng)自動設(shè)定閾值或允許手動調(diào)整;
標(biāo)準(zhǔn)曲線功能:支持絕對定量、拷貝數(shù)分析;
相對定量分析:ΔCt、ΔΔCt方法一鍵完成;
SNP分型與HRM分析:支持TaqMan MGB探針及高分辨熔解曲線模塊(升級后支持);
圖表報(bào)告導(dǎo)出:可生成PDF、Excel格式報(bào)告,便于歸檔與發(fā)表。
軟件支持模板文件建立與實(shí)驗(yàn)復(fù)制,減少重復(fù)設(shè)定操作時(shí)間,提高數(shù)據(jù)一致性。
7500 / 7500 Fast 系統(tǒng)支持多種分子實(shí)驗(yàn),尤其適合中等通量下對結(jié)果穩(wěn)定性要求較高的任務(wù):
通過SYBR Green法或TaqMan探針體系實(shí)現(xiàn)目標(biāo)基因表達(dá)量變化分析,適合研究藥物調(diào)控、應(yīng)激響應(yīng)與轉(zhuǎn)錄機(jī)制。
快速識別細(xì)菌、病毒或真菌核酸序列,特別適用于病原體快速篩查、傳染病流行追蹤及臨床預(yù)警。
配合商業(yè)探針或自定義引物,可實(shí)現(xiàn)EGFR、KRAS、BRAF等突變熱點(diǎn)位點(diǎn)分析,為個(gè)性化治療提供依據(jù)。
進(jìn)行CNV(Copy Number Variation)分析、SNP分型與基因型篩查,適用于遺傳疾病、胚胎檢測及家族病譜分析。
對轉(zhuǎn)基因作物、食品添加劑、環(huán)境樣品中生物污染進(jìn)行靈敏檢測,是食品安全及生態(tài)監(jiān)測領(lǐng)域的得力工具。
保持20-25bp長度,GC含量在45%-60%;
回避二聚體與發(fā)夾結(jié)構(gòu);
探針置于引物之間,避免重疊;
建議使用TaqMan或MGB修飾探針以提高特異性。
使用原廠推薦的0.2 mL光學(xué)板或8聯(lián)管;
使用ROX作為被動參比染料(系統(tǒng)自動校正);
建議使用Fast試劑體系時(shí)選擇Fast熱循環(huán)程序;
| 步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 
|---|---|---|
| 初始變性 | 95°C | 10分鐘 | 
| 變性 | 95°C | 15秒 | 
| 退火/延伸 | 60°C | 60秒 | 
| 循環(huán)次數(shù) | — | 40次 | 
Fast反應(yīng)條件下退火/延伸可縮短至30秒以內(nèi)。
設(shè)定NTC對照、陽性對照和標(biāo)準(zhǔn)曲線;
使用融解曲線分析檢測非特異擴(kuò)增;
引入?yún)⒖蓟蜻M(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化;
檢查擴(kuò)增效率是否在90%-110%范圍內(nèi)。
7500系列設(shè)備在全球?qū)嶒?yàn)室中經(jīng)受多年考驗(yàn),以高穩(wěn)定性、可重復(fù)性與維護(hù)友好著稱:
每臺設(shè)備出廠前通過嚴(yán)格光學(xué)與溫控測試;
具備長時(shí)間運(yùn)行穩(wěn)定性,適合連續(xù)樣本處理;
提供完善的本地化技術(shù)支持、校準(zhǔn)服務(wù)與用戶培訓(xùn);
軟件定期更新,確保兼容性與數(shù)據(jù)安全;
可選購校準(zhǔn)套件、探針試劑及Fast模塊升級組件。
Applied Biosystems 7500 / 7500 Fast 實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)憑借其高質(zhì)量的光學(xué)模塊、穩(wěn)定的熱循環(huán)系統(tǒng)、兼容多種應(yīng)用需求的軟件平臺以及良好的用戶體驗(yàn),成為中高通量實(shí)驗(yàn)室及研究單位理想的qPCR解決方案。
無論是在基因功能研究、臨床分子檢測,還是在環(huán)境與食品安全領(lǐng)域,7500系列以其靈活性和可靠性為基礎(chǔ)研究與轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)提供了堅(jiān)實(shí)保障。其在科研與臨床之間的橋梁作用,也使其成為高校、醫(yī)院與生物技術(shù)公司信賴的核心平臺之一。
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