賽默飛洗板機(jī) Wellwash 1x8 校準(zhǔn)方法詳解

一、設(shè)備概述

賽默飛 Wellwash 1x8 洗板機(jī)是一款面向常規(guī) ELISA 實(shí)驗(yàn)和 96 孔微孔板清洗任務(wù)的自動(dòng)化設(shè)備。它采用 單排 8 通道噴頭，能夠逐行完成清洗任務(wù)。相較于 1x12 型號(hào)，1x8 更適合精細(xì)化清洗，液體使用量較低，尤其適用于實(shí)驗(yàn)量中等、對(duì)操作靈活度要求較高的實(shí)驗(yàn)室。

校準(zhǔn)是保證 Wellwash 1x8 穩(wěn)定運(yùn)行的前提。只有通過(guò)科學(xué)的校準(zhǔn)方法，才能確保噴液均勻、吸液徹底、針頭高度精準(zhǔn)，從而避免因殘液過(guò)多、洗滌不均而影響 ELISA 信號(hào)讀數(shù)。

二、校準(zhǔn)的目的與意義

1. 確保液體分布均一

• 保證每一行 8 個(gè)孔內(nèi)液體體積一致，避免邊緣效應(yīng)。

2. 降低背景信號(hào)

• 通過(guò)校準(zhǔn)，殘液量減少，未結(jié)合物被完全去除，從而減少假陽(yáng)性和背景噪音。

3. 延長(zhǎng)設(shè)備壽命

• 合理的參數(shù)設(shè)定減少管路堵塞、針頭損耗，提高使用壽命。

4. 提升實(shí)驗(yàn)可重復(fù)性

• 在不同批次、不同人員操作下，仍能獲得一致的清洗效果。

三、校準(zhǔn)前的準(zhǔn)備工作

1. 環(huán)境與設(shè)備檢查

• 確保設(shè)備放置平穩(wěn)，避免震動(dòng)。

• 室內(nèi)溫度保持在 15-30℃，相對(duì)濕度低于 70%。

• 電源電壓穩(wěn)定，插座接地良好。

2. 液體與耗材準(zhǔn)備

• 使用新鮮 PBS、TBS 或 PBS-T 緩沖液作為校準(zhǔn)用清洗液。

• 配備標(biāo)準(zhǔn) 96 孔微孔板，建議使用透明板，便于觀察殘液。

• 準(zhǔn)備少量帶色染液（如稀釋甲基藍(lán)），用于檢測(cè)清洗均一性。

3. 管路與針頭檢查

• 確認(rèn)進(jìn)液瓶中液體充足，廢液瓶為空。

• 檢查進(jìn)液管、廢液管無(wú)漏液。

• 確認(rèn) 8 個(gè)噴針排列整齊，無(wú)彎曲或堵塞。

四、核心校準(zhǔn)步驟

1. 開機(jī)自檢與液路排氣

• 打開電源，等待系統(tǒng)完成自檢。

• 運(yùn)行“Prime”功能，將清洗液充滿管路，排除空氣泡。

• 觀察 8 個(gè)噴針是否同時(shí)均勻出液。若有不暢，需進(jìn)一步清洗或疏通。

2. 進(jìn)液體積校準(zhǔn)

• 設(shè)定初始進(jìn)液體積（如 300 μL/孔）。

• 將程序運(yùn)行一次，觀察每孔液體高度。

• 若液體不足，可逐步增加進(jìn)液量至 350 μL；若溢出，則調(diào)小體積或減慢注液速度。

3. 吸液針高度校準(zhǔn)

• 將針頭調(diào)整至接近孔底但不接觸，通常為 0.1-0.2 mm 間隙。

• 運(yùn)行程序，檢查殘液：

• 若殘液明顯，則說(shuō)明針頭過(guò)高；

• 若針頭劃傷孔底，則說(shuō)明過(guò)低。

• 最佳狀態(tài)是孔底僅留一層極薄水膜。

4. 吸液延時(shí)與泵速調(diào)節(jié)

• 在程序中增加 1-2 秒吸液延時(shí)，確保液滴完全被抽出。

• 對(duì)于高粘度液體，可適度減緩泵速，避免吸液不徹底。

5. 浸泡時(shí)間校準(zhǔn)

• 對(duì)于標(biāo)準(zhǔn) ELISA，浸泡 20-30 秒即可。

• 若非特異性結(jié)合較強(qiáng)，可延長(zhǎng)至 60 秒。

• 若細(xì)胞附著實(shí)驗(yàn)，應(yīng)減少浸泡時(shí)間，避免目標(biāo)細(xì)胞脫落。

6. 清洗次數(shù)優(yōu)化

• 默認(rèn) 3 次清洗足以滿足大部分實(shí)驗(yàn)。

• 對(duì)于背景高的實(shí)驗(yàn)，增加至 5 次；對(duì)于敏感實(shí)驗(yàn)，避免過(guò)度清洗以免損傷結(jié)合物。

7. 均一性測(cè)試

• 在校準(zhǔn)過(guò)程中，使用染色液檢測(cè)清洗效果：

• 將染液加入孔內(nèi)，運(yùn)行清洗程序；

• 觀察殘留顏色是否一致；

• 若邊緣孔與中間孔差異較大，需檢查板托水平或針頭對(duì)齊度。

五、功能驗(yàn)證與調(diào)試實(shí)驗(yàn)

1. 空板驗(yàn)證

• 使用空板運(yùn)行一次，確認(rèn)噴液和吸液動(dòng)作流暢。

2. 殘液量測(cè)定

• 清洗后稱量微孔板，計(jì)算殘液量，判斷吸液是否充分。

3. 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)

• 連續(xù)運(yùn)行同一程序 5 次，檢查不同板間清洗效果是否一致。

4. 儀器內(nèi)部檢查

• 運(yùn)行完成后，檢查泵體和管路有無(wú)異常噪音或震動(dòng)。

六、常見問(wèn)題與解決方案

1. 噴液不均

• 原因：針頭堵塞或有氣泡。

• 解決：用超聲波清洗針頭或重新排氣。

2. 吸液不徹底

• 原因：針頭過(guò)高、泵壓不足或殘液滯留。

• 解決：調(diào)低針頭、增加吸液延時(shí)、檢查泵壓。

3. 清洗效果不一致

• 原因：板托不平或針頭排列偏斜。

• 解決：調(diào)整板托水平，重新安裝針頭。

4. 背景偏高

• 原因：洗滌不充分或緩沖液不合適。

• 解決：增加清洗次數(shù)或更換緩沖液。

5. 管路滲漏

• 原因：接口松動(dòng)或老化。

• 解決：重新安裝或更換管路。

七、維護(hù)與優(yōu)化

1. 每日維護(hù)

• 校準(zhǔn)完成后，運(yùn)行去離子水清洗程序。

• 倒空廢液瓶并沖洗干凈。

2. 定期維護(hù)

• 每周檢查針頭是否有鹽析，必要時(shí)清洗。

• 每月檢查泵體和管路密封性，替換老化部件。

3. 長(zhǎng)期停機(jī)保護(hù)

• 用純水沖洗管路，再注入 70% 酒精保存。

• 覆蓋防塵罩，保持干燥環(huán)境。

4. 建立 SOP

• 將校準(zhǔn)步驟記錄為實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)程，確保不同人員操作一致。

八、應(yīng)用經(jīng)驗(yàn)總結(jié)

1. ELISA 實(shí)驗(yàn)

• 推薦 PBS-T 緩沖液，校準(zhǔn)進(jìn)液體積 300 μL，吸液延時(shí) 2 秒，清洗 4 次。

2. 細(xì)胞相關(guān)實(shí)驗(yàn)

• 避免高壓沖洗，進(jìn)液速度設(shè)為中等，針頭高度略高，保護(hù)細(xì)胞層。

3. 大批量樣本檢測(cè)

• 建議批量校準(zhǔn)參數(shù)并保存為固定程序，減少重復(fù)設(shè)置。

4. 多人員操作實(shí)驗(yàn)室

• 應(yīng)建立電子記錄表格，追蹤每次校準(zhǔn)參數(shù)和結(jié)果，方便追溯。

九、總結(jié)

賽默飛 Wellwash 1x8 洗板機(jī)的校準(zhǔn)方法涉及 液路排氣、進(jìn)液體積調(diào)節(jié)、針頭高度設(shè)定、吸液延時(shí)控制、浸泡時(shí)間與清洗次數(shù)優(yōu)化 等多個(gè)環(huán)節(jié)?？茖W(xué)的校準(zhǔn)不僅能顯著降低背景噪音，還能提升實(shí)驗(yàn)重復(fù)性和準(zhǔn)確性，同時(shí)延長(zhǎng)設(shè)備壽命。通過(guò)建立標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程，結(jié)合日常維護(hù)與經(jīng)驗(yàn)積累，實(shí)驗(yàn)室能夠穩(wěn)定發(fā)揮 Wellwash 1x8 的性能，為 ELISA 和相關(guān)檢測(cè)提供可靠保障。