確保離心實(shí)驗(yàn)在安全、穩(wěn)定、可重復(fù)的條件下進(jìn)行,為后續(xù)樣品分離、濃縮、沉淀或純化提供高質(zhì)量基礎(chǔ)。
溫度范圍:室溫 15 – 30 °C;
濕度:≤ 75%;
工作臺(tái):平穩(wěn)堅(jiān)固、耐振動(dòng)、防滑;
電源條件:AC 220 V ± 10%,50/60 Hz,獨(dú)立接地;
通風(fēng)空間:機(jī)體四周保持至少 10 cm 距離,避免堵塞冷凝風(fēng)道;
光照與噪音環(huán)境:避免強(qiáng)光直射和周圍大型振動(dòng)源。
電源指示燈亮起后顯示屏應(yīng)正常啟動(dòng);
蓋鎖機(jī)構(gòu)開(kāi)合靈活,無(wú)卡滯;
轉(zhuǎn)子座與主軸干凈無(wú)灰塵與銹斑;
冷凝通風(fēng)口暢通無(wú)阻;
報(bào)警提示處于待機(jī)狀態(tài),無(wú)錯(cuò)誤代碼。
樣品管(0.2 mL、0.5 mL、1.5 mL、2 mL 類型)配合匹配轉(zhuǎn)子;
各類轉(zhuǎn)子:微量管轉(zhuǎn)子、PCR 條管轉(zhuǎn)子、適配器;
吸頭、移液槍及防污染裝置;
平衡用蒸餾水或等密度溶液。
選擇合適的緩沖體系;
去除雜質(zhì)顆粒,防止轉(zhuǎn)子不平衡;
對(duì)需冷凍的樣品,提前預(yù)冷至 4 °C。
接通電源,打開(kāi)主電源開(kāi)關(guān);
顯示屏亮起并完成系統(tǒng)自檢;
顯示 “READY” 表示設(shè)備處于待機(jī)狀態(tài)。
若實(shí)驗(yàn)需在 4 °C 下運(yùn)行,建議使用 “PRECOOL” 功能;
設(shè)置目標(biāo)溫度(如 4 °C)并按下 PRECOOL 鍵;
等待腔體溫度穩(wěn)定,顯示屏提示 “PRECOOL DONE”;
預(yù)冷過(guò)程中不應(yīng)放置樣品管,以防冷凝水影響平衡。
確認(rèn)蓋鎖開(kāi)關(guān)靈敏;
核對(duì)轉(zhuǎn)子型號(hào)與設(shè)定速度匹配;
檢查實(shí)驗(yàn)記錄表是否填寫(xiě)完整。
所有離心管必須對(duì)稱放置。若樣品數(shù)為奇數(shù),應(yīng)使用平衡管補(bǔ)齊,平衡誤差不超過(guò) 0.01 g。
根據(jù)實(shí)驗(yàn)類型選擇合適轉(zhuǎn)子;
將樣品管輕放入孔位中,避免撞擊;
若含揮發(fā)性或腐蝕性溶液,需使用密封蓋或O形圈防護(hù);
確認(rèn)各管液面高度一致,無(wú)氣泡;
蓋上轉(zhuǎn)子蓋并旋緊螺帽。
對(duì)生物樣品操作時(shí),戴防護(hù)手套與護(hù)目鏡;
使用一次性離心管并避免交叉污染;
若樣品有潛在生物風(fēng)險(xiǎn),放入生物安全封閉轉(zhuǎn)子中。
打開(kāi)機(jī)蓋并檢查主軸潔凈;
將轉(zhuǎn)子垂直插入主軸孔中;
順時(shí)針旋緊固定螺帽至止點(diǎn);
確認(rèn)轉(zhuǎn)子與主軸結(jié)合緊密,不得晃動(dòng)。
關(guān)閉上蓋直至聽(tīng)到“咔噠”聲;
屏幕提示 “LID LOCKED” 后方可啟動(dòng);
若蓋未鎖緊,系統(tǒng)將顯示錯(cuò)誤代碼 E01 并禁止運(yùn)行。
依次輸入:
轉(zhuǎn)速 → 離心時(shí)間 → 溫度 → 加減速等級(jí) → 程序編號(hào)(可選)。
按 SET 鍵進(jìn)入?yún)?shù)界面;
通過(guò) UP/DOWN 鍵調(diào)整數(shù)值;
按 ENTER 鍵確認(rèn)后切換下一項(xiàng);
設(shè)置完成后按 MODE 鍵選擇顯示 rpm 或 RCF;
若需保存為固定方案,按 PROG 鍵存儲(chǔ)。
| 實(shí)驗(yàn)類型 | 轉(zhuǎn)速 (rpm) | 時(shí)間 (min) | 溫度 (°C) |
|---|---|---|---|
| 血清分離 | 3,000 | 10 | 20 |
| RNA 提取 | 12,000 | 15 | 4 |
| 蛋白沉淀 | 10,000 | 10 | 4 |
| 細(xì)胞收集 | 2,000 | 5 | 4 |
| 微生物沉淀 | 8,000 | 10 | 4 |
確認(rèn)所有參數(shù)無(wú)誤后,按 START 鍵;
設(shè)備自動(dòng)加速至目標(biāo)轉(zhuǎn)速;
顯示屏實(shí)時(shí)顯示 rpm、溫度、剩余時(shí)間。
注意觀察聲音是否均勻;
若出現(xiàn)異常震動(dòng)或報(bào)警,應(yīng)立即按 STOP 鍵終止運(yùn)行;
不可在運(yùn)行中嘗試打開(kāi)蓋鎖。
設(shè)備自動(dòng)減速,轉(zhuǎn)速降至 0 rpm 后顯示 “END”;
蜂鳴提示實(shí)驗(yàn)完成;
待蓋鎖自動(dòng)釋放后方可開(kāi)蓋。
確保轉(zhuǎn)速顯示為 0 rpm;
按下蓋鎖開(kāi)關(guān),緩慢開(kāi)啟上蓋;
取出轉(zhuǎn)子,輕放在耐熱防震墊上;
逐一取出樣品管,避免液體晃動(dòng);
若樣品為生物類,應(yīng)在生物安全柜中操作。
上清液與沉淀分離時(shí),使用移液器輕取;
對(duì)溫度敏感樣品,立即置于 4 °C 環(huán)境或冰上保存;
離心后管壁殘留液可用吸頭輕觸吸取。
使用中性洗液與柔軟布清潔轉(zhuǎn)子表面;
清洗后用去離子水沖凈并晾干;
若轉(zhuǎn)子為鋁合金材質(zhì),可涂薄層防銹硅脂。
擦拭冷凝水,保持腔體干燥;
檢查是否有樣品溢出或殘留;
用濕布清潔后再用干布擦凈。
按 STOP 鍵或關(guān)閉電源開(kāi)關(guān);
拔下電源插頭;
打開(kāi)上蓋通風(fēng) 10–15 分鐘。
將樣品溶液轉(zhuǎn)入 1.5 mL 離心管;
設(shè)定 12,000 rpm、10 min、4 °C;
離心后棄去上清,保留沉淀;
重復(fù)洗滌步驟直至純化完成。
樣品加等體積沉淀劑(如丙酮或三氯乙酸);
靜置 30 分鐘后設(shè)定 10,000 rpm、10 min、4 °C;
離心后棄上清,用緩沖液洗滌沉淀;
低溫保存或溶解用于后續(xù)分析。
懸浮細(xì)胞培養(yǎng)液裝入離心管;
設(shè)定 2,000 rpm、5 min、4 °C;
離心后小心棄上清;
用 PBS 洗滌兩次備用。
使用前確保轉(zhuǎn)子及樣品平衡;
不得超過(guò)轉(zhuǎn)子允許最高轉(zhuǎn)速;
不得處理放射性或高腐蝕性物質(zhì);
若出現(xiàn)報(bào)警(如 E02 不平衡、E03 過(guò)熱)立即停機(jī)。
每次實(shí)驗(yàn)記錄樣品編號(hào)、運(yùn)行參數(shù)與操作者姓名;
建立電子文檔保存運(yùn)行數(shù)據(jù);
記錄異常情況及處理措施。
同類型樣品應(yīng)使用相同參數(shù)條件;
定期校驗(yàn)轉(zhuǎn)速與溫控精度;
使用同批次耗材減少偏差。
| 問(wèn)題 | 可能原因 | 解決方法 |
|---|---|---|
| 蓋鎖無(wú)法開(kāi)啟 | 轉(zhuǎn)速未歸零或鎖卡滯 | 等待轉(zhuǎn)子完全停止后重試 |
| 啟動(dòng)后振動(dòng)劇烈 | 樣品不平衡或轉(zhuǎn)子未裝緊 | 檢查并重新配平 |
| 溫度下降緩慢 | 通風(fēng)口堵塞或冷凝器臟污 | 清潔散熱部位 |
| 顯示報(bào)警 E03 | 電機(jī)溫度過(guò)高 | 停機(jī)冷卻 10 分鐘 |
| 離心結(jié)束未報(bào)警 | 蜂鳴器關(guān)閉或系統(tǒng)設(shè)置錯(cuò)誤 | 檢查設(shè)置菜單并恢復(fù)默認(rèn) |
設(shè)立標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOP):統(tǒng)一所有操作人員的離心流程。
使用前清單檢查:確保每次運(yùn)行前完成設(shè)備自檢與平衡確認(rèn)。
建立樣品追蹤體系:實(shí)驗(yàn)日期、參數(shù)、樣品編號(hào)一一對(duì)應(yīng)。
定期維護(hù)記錄:每周清潔,每季度校準(zhǔn),每年由專業(yè)人員檢修。
溫度與轉(zhuǎn)速校準(zhǔn)文件化:確保所有實(shí)驗(yàn)結(jié)果可追溯。
樣品密度匹配
平衡管液體密度應(yīng)與樣品相同,以防離心力偏差。
加速/減速曲線選擇
對(duì)易分層樣品使用緩慢減速模式,避免擾動(dòng)沉淀。
溫控策略
對(duì)酶類、RNA 等熱敏樣品,建議全程 4 °C 運(yùn)行并提前預(yù)冷。
轉(zhuǎn)子選擇優(yōu)化
微量管樣品:使用 24 × 2 mL 標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)子;
PCR 反應(yīng)管:選 36 × 0.2 mL 轉(zhuǎn)子;
需封閉操作樣品:使用帶密封蓋轉(zhuǎn)子。
實(shí)驗(yàn)結(jié)束后設(shè)備復(fù)位
運(yùn)行完畢后應(yīng)恢復(fù)默認(rèn)參數(shù)(3,000 rpm、5 min、20 °C),防止下次誤操作。
每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)填寫(xiě)離心記錄表,包括:
樣品編號(hào)與類型;
轉(zhuǎn)速、溫度、時(shí)間、轉(zhuǎn)子型號(hào);
操作者與日期;
異常情況及備注。
建議使用電子版記錄表格存檔,并定期備份。
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