本設(shè)備為冷凍型微量離心機,具備腔室溫度設(shè)定功能,其溫度范圍可達約 -9 °C 至 +40 °C。
溫度控制的目的在于:
對溫度敏感的樣本(如酶反應中期、細胞裂解產(chǎn)物、RNA/DNA 樣本、低熱穩(wěn)定蛋白)進行離心時,避免溫度升高造成結(jié)構(gòu)破壞或活性損失。
在高速離心過程中減少熱量積累(例如由摩擦或空氣壓縮引起的腔室升溫)對樣本的影響。
提供預冷功能,使腔室及轉(zhuǎn)子達到所設(shè)定溫度后再加載樣本或啟動,以保證樣本從“冷態(tài)”進入高速離心,從而提升分離效果或穩(wěn)定性。
溫控系統(tǒng)在關(guān)閉離心蓋、設(shè)定溫度低于當前腔體溫度后,會自動啟動降溫過程。
溫度顯示面板顯示當前腔室溫度,并可切換至預設(shè)溫度顯示模式。觸摸或按鍵設(shè)定時,用戶可調(diào)整至所需溫度。
以下為設(shè)定溫度的標準流程,請嚴格按步驟操作:
確保設(shè)備已開啟并處于待機狀態(tài)(主電源已開、蓋鎖已正常、轉(zhuǎn)子已安裝或處于空載狀態(tài))。
確保腔室內(nèi)部無殘留樣本、管件或異物,且轉(zhuǎn)子安裝正確。
若剛剛運行完畢,建議等待腔室溫度回到接近室溫狀態(tài)再進行設(shè)定,以避免溫差過大影響降溫時間。
在控制面板上選擇“Temperature”(溫度)區(qū)域。
按“↑”或“↓”鍵進入預設(shè)模式(預選溫度模式)——短按可逐步增加/減少 1 °C,長按可快速跳變。
當顯示閃爍表示處于設(shè)定模式。
根據(jù)樣品要求輸入所需溫度,例如 4 °C、-10 °C、20 °C 等。
調(diào)整完成后松手,顯示停止閃爍,設(shè)備將記憶該預設(shè)溫度值。
設(shè)定完成后關(guān)閉離心蓋,確保蓋已鎖定。冷卻系統(tǒng)將在預設(shè)溫度低于當前腔室溫度時立即啟動。
等待腔室溫度下降至目標溫度或接近該值。
若設(shè)備支持“預冷(Pre-temp)”功能,可先啟動空載轉(zhuǎn)子、開啟該功能以加速腔室降溫,再加載樣品。
當腔室溫度顯示接近或等于設(shè)定值后,打開蓋子、裝載樣本,確保平衡良好。
再次關(guān)閉蓋子、鎖定、設(shè)定離心參數(shù)(速度、RCF、時間等),然后啟動離心。
操作過程中,建議避免頻繁開蓋,同時注意溫度波動。
21R 型裝置提供“預冷”功能,該功能可空載時將轉(zhuǎn)子及腔室快速降溫至設(shè)定值。
操作方法:選擇“Pre-temp”鍵,輸入設(shè)定溫度,再按“Start”鍵。指示燈會亮起,表示預冷開始。
預冷狀態(tài)下設(shè)備可能以較高轉(zhuǎn)速運行轉(zhuǎn)子以加快溫度傳導,但須確保轉(zhuǎn)子上無樣品。
使用預冷功能的好處:減少樣品加載后等待時間,提升離心穩(wěn)定性、減少溫度升高對樣本影響。
注意事項:預冷時避免裝載樣品,且樣品在加載前腔室應達到接近設(shè)定溫度。
從室溫(如 20 °C)降至設(shè)定溫度(如 4 °C)需要一定時間。溫差越大,所需時間越長。
顯示屏上的腔室溫度與樣本實際溫度可能存在延遲差異。設(shè)備內(nèi)部溫度已達設(shè)定,不意味著樣品本身溫度也已完全等于設(shè)定。
對于溫度敏感或關(guān)鍵實驗,請考慮加載少量測試管測定實際樣品溫度情況。
蛋白樣本、酶反應、RNA/DNA 提取常要求 4 °C 或更低溫度離心,以減少降解或熱擾動。
若樣品為細胞裂解液、代謝產(chǎn)物、低溫保存樣本,設(shè)定溫度可為 0-4 °C。
常規(guī)樣品若無溫度敏感要求,也可在室溫運行,但冷卻功能仍可提供溫度穩(wěn)定環(huán)境。
避免將樣品裝入設(shè)定溫度大幅低于樣品預處理溫度的狀態(tài)而立即離心,否則可能出現(xiàn)冷凝、水蒸氣析出、冰晶形成,影響管內(nèi)結(jié)構(gòu)或產(chǎn)生擾動。
設(shè)備應放置于通風良好、無直射陽光、高溫或強熱源影響的位置。若環(huán)境溫度過高,冷卻效率會下降。
冷卻系統(tǒng)的散熱孔、過濾器應保持清潔、無塵堵,否則制冷效率及溫控性能會受到影響。
在設(shè)定低溫時,如環(huán)境溫度接近設(shè)備設(shè)定溫度,降溫速度會慢,甚至無法達到極限溫度。
高速離心過程中,轉(zhuǎn)子高速旋轉(zhuǎn)、摩擦及空氣壓縮可能產(chǎn)生熱量;設(shè)定低溫可中和這部分熱量對樣品的影響。
若離心時間較長、負載較大(管數(shù)多、離心力度強),冷卻系統(tǒng)應提前啟動溫度設(shè)定,以保證開始時設(shè)備已接近目標溫度。
裝載樣品前確認轉(zhuǎn)子、管件已冷卻至適當溫度,以避免內(nèi)壁溫差導致析氣或液態(tài)樣品擾動。
預準備:在實驗前 5 – 10 分鐘將設(shè)備設(shè)定至所需溫度,并等待腔室溫度穩(wěn)定,再加載樣本。
空載預冷:若樣本特別敏感,使用預冷功能空載運行轉(zhuǎn)子至設(shè)定溫度,再暫停、打開蓋子、裝樣。
裝載注意:采用預冷后裝入樣品時,樣品尖端應溫度接近腔室溫度,避免“熱”樣本進入“冷”腔體造成不穩(wěn)定。
離心啟動后監(jiān)控:啟動離心后,可觀察設(shè)備顯示的腔室溫度是否維持設(shè)定狀態(tài);若出現(xiàn)顯著偏差,應考慮暫停檢查。
離心結(jié)束后的樣品處理:離心完成后,若離心溫度為低溫狀態(tài),建議快速移出樣品或進一步保持低溫(例如放置于冰上)以防熱沖擊。
非溫度敏感樣品:即便樣品對溫度要求不高,建議仍設(shè)定低溫(如 10 °C)以提高樣品穩(wěn)定性及離心一致性。
記錄與校驗:對經(jīng)常使用的溫敏流程,應記錄設(shè)定溫度、實際程序、腔室溫度曲線及樣品狀態(tài),以便后續(xù)質(zhì)量控制。
維護保養(yǎng):設(shè)定低溫運行后,應定期檢查冷卻系統(tǒng)狀態(tài)、散熱孔及過濾器清潔、密封件狀態(tài),以確保溫控性能長期穩(wěn)定。
RNA 提取離心:設(shè)定溫度 4 °C,以減少核酸降解、酶活性突增、熱擾動。加載樣品前預冷至 4 °C,再離心。
蛋白體外裂解混合物:可設(shè)定 0-4 °C,特別是在含蛋白酶抑制劑、溫度敏感結(jié)構(gòu)蛋白樣本中。
一般血漿或細胞培養(yǎng)上清離心:如溫度敏感性較低,可設(shè)定 10-15 °C,以兼顧速度與冷卻效率。
低溫保存樣品末端處理:如之前樣品保存在 -20 °C 或 -80 °C 狀態(tài),可設(shè)定低溫(如 -9 °C 或 -5 °C)并預冷后快速離心,減少回溫時間。
室溫樣品快速離心:若樣品對溫度不敏感,可設(shè)定 20-25 °C,但建議仍使用低溫模式(如 10-15 °C)以提升穩(wěn)定性。
若設(shè)定溫度低于當前腔室溫度但設(shè)備未啟動降溫,應檢查是否關(guān)閉了制冷運行、是否蓋鎖未關(guān)閉、是否散熱孔堵塞。
若設(shè)備冷卻后仍無法達到設(shè)定溫度(例如未降至 -9 °C),應檢查設(shè)備環(huán)境溫度是否過高、過濾器是否堵塞、是否有異常噪音或警報。
若樣本入管后發(fā)現(xiàn)凝結(jié)、水珠或冰晶,可能是溫差過大、離心管預冷不足、或腔室設(shè)定溫度過低。應考慮將目標溫度提高或縮短預冷時間。
若樣本溫度升高或樣本受熱影響(如蛋白變性、溶解液揮發(fā)),建議在離心過程中監(jiān)控設(shè)備顯示溫度,必要時暫停并檢驗冷卻系統(tǒng)。
若冷卻過程中出現(xiàn)“冰霜”堆積、散熱困難或制冷系統(tǒng)報錯,應停止使用并聯(lián)系維修,避免損壞設(shè)備或影響樣品。
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