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賽默飛（Thermo Fisher Scientific）Legend Micro 21R 高速冷凍離心機是一款為分子生物學、細胞生物學、臨床檢測與蛋白質研究而設計的高性能微量離心機。該設備以高轉速（最高 21,100 rpm）、精準溫控（–10 ℃ 至 +40 ℃）和優(yōu)異的安全性能而聞名。
它能快速實現樣品分層、沉淀、提取與純化，在核酸、蛋白、細胞組分分離等實驗中表現出高效率與高重復性。為了最大化設備性能并延長使用壽命，操作者需熟悉正確的使用技巧與優(yōu)化操作方法。
將離心機放置于平穩(wěn)、堅固的實驗臺面上，遠離震動源與熱源。
環(huán)境溫度保持在 10–35 ℃，相對濕度低于 80%。
設備四周留出至少 10 cm 空間，保證空氣流通與散熱。
確保供電電壓與銘牌參數一致（通常為 AC 220 V，50 Hz）。
插座必須帶有接地保護，避免因靜電或漏電造成設備損壞。
打開蓋門檢查腔體內部是否干凈，無液體或異物。
檢查轉子、適配器和主軸表面是否完好、無裂痕。
檢查密封圈彈性良好，確保蓋門關閉后能完全鎖定。
對于低溫敏感樣品（如酶、蛋白質、核酸等），應提前預冷：
在空載狀態(tài)下設定目標溫度（如 4 ℃），運行 10–15 分鐘。
若實驗在高溫環(huán)境進行，可延長預冷時間以防溫度波動。
所有離心管必須 對稱放置，重量差不得超過 0.01 g。
若樣品數量為奇數，可用等體積水替代空管平衡。
液體體積不應超過管體的 80%，防止離心時溢出。
樣品管蓋必須擰緊，避免氣溶膠或液體外泄。
使用高精度分析天平配平，尤其在高轉速（>15,000 rpm）條件下。
當樣品種類不同、密度差異大時，建議以“總質量”而非“體積”配平。
平衡管材料、品牌及型號應與實驗樣品管一致，以減少微差。
對含揮發(fā)性或腐蝕性溶液樣品，應采用防氣溶膠密封轉子蓋。
處理粘稠樣品時，離心管底部可先加入少量緩沖液以防沉淀粘附。
根據樣品性質設定合適轉速：
細胞沉淀：1,000–3,000 rpm
蛋白沉淀：10,000–14,000 rpm
核酸提取：12,000–15,000 rpm
病毒與亞細胞分離：18,000–21,000 rpm
不可超過轉子銘牌標示的最高允許轉速。
如果儀器以 rpm 顯示，可用以下公式換算為離心力（RCF）：
RCF=1.118×10?5×r×(rpm)2RCF = 1.118 \times 10^{-5} \times r \times (rpm)^2RCF=1.118×10?5×r×(rpm)2
其中，r 為轉子半徑（cm）。根據實驗需求調節(jié)離心力更為精確。
常用溫度為 4 ℃，用于保護生物活性樣品。
對一般樣品（如血漿、沉淀液）可使用室溫模式。
低于 0 ℃ 的離心操作應提前預冷轉子與離心管。
Soft 模式：適合蛋白質、細胞等易碎樣品。
Rapid 模式：適用于短時間核酸或顆粒分離。
根據樣品脆弱性選擇啟動曲線可顯著提升分離效果。
開機后系統(tǒng)會自動檢測蓋鎖、溫度傳感器與電機狀態(tài)。若顯示錯誤代碼，應立即停止操作并檢查原因。
不可在設備運行時打開蓋門。
若聽到異常噪音或振動，立即按下 STOP 鍵。
避免在離心過程中頻繁更改參數，以免造成系統(tǒng)誤差。
等待轉子完全停止且顯示屏提示“END”后再開蓋。
取樣時動作輕柔，防止沉淀層擾動。
清除腔體內冷凝水或樣品殘液，保持干燥。
將樣品按編號順序放置于轉子上，記錄位置，防止混淆。
若需連續(xù)運行多個批次，可在每次操作間隔 5–10 分鐘以防過熱。
固定角轉子：用于核酸、蛋白等高轉速沉淀。
水平轉子：適合密度梯度分離與細胞樣品。
PCR排管轉子：專用于0.2 mL PCR管，方便批量操作。
根據實驗需求選型能大幅提高分離效果與效率。
設定溫度前先讓設備在設定點下預冷運行。
若實驗室環(huán)境較冷，啟動制冷模式前可讓設備空載運行 2 分鐘。
避免頻繁開關蓋門，防止冷氣外泄。
對于需快速沉淀的樣品，可采用“脈沖離心”：
設置短時間（30–60 秒）的高速運行，快速形成沉淀。
此法常用于收集小體積溶液底部樣品。
離心后輕輕倒置或輕拍離心管底部，防止沉淀粘壁。
避免使用劇烈震蕩或吹打方式，以免破壞結構。
每次運行前務必確認樣品配平正確。
使用不平衡檢測系統(tǒng)測試傳感器靈敏度。
一旦出現震動或報警，立即停機重新配平。
使用設備自動轉子識別功能，防止誤設過速。
若更換非原裝轉子，必須重新校準最大轉速。
確保通風孔暢通、冷凝器干凈。
長時間運行后，適當休機散熱。
離心前確認離心管密封良好。
使用防氣溶膠蓋處理潛在生物危害樣品。
離心結束后及時消毒腔體。
| 常見誤區(qū) | 可能后果 | 正確做法 |
|---|---|---|
| 樣品未配平 | 振動嚴重、主軸損傷 | 使用天平精確配平 |
| 離心管未封口 | 液體外泄、污染設備 | 使用合適密封管 |
| 超過最大容量 | 液體溢出、轉子腐蝕 | 控制裝液量 ≤80% |
| 未預冷即高速運行 | 樣品變性 | 預冷 10–15 分鐘 |
| 離心后立即開蓋 | 轉子未停穩(wěn)傷人 | 等待顯示“END”后開蓋 |
| 用強酸清潔 | 腔體腐蝕 | 使用中性清潔劑 |
核酸提取實驗
使用 12,000–15,000 rpm 離心 10 分鐘。
保持 4 ℃ 運行，防止 DNA 降解。
上清液清澈無濁度即為最佳效果。
蛋白質沉淀實驗
使用低速離心去除雜質，再進行高速分離。
控制溫度在 4 ℃，避免蛋白失活。
細胞收集實驗
先以 800–1,000 rpm 低速收集細胞。
避免轉速過高造成細胞裂解。
病毒純化實驗
使用密度梯度離心法，控制轉速穩(wěn)定。
確保溫度恒定，減少剪切力。
擦拭腔體、轉子與主軸，防止腐蝕。
將蓋門半開保持干燥，避免冷凝。
建立運行日志，記錄使用次數、運行時間、異常情況。
每3個月檢查一次主軸、門鎖與制冷系統(tǒng)。
清潔后晾干，表面涂防銹油。
長期不使用時單獨密封存放。
程序化操作
使用設備的記憶功能，存儲常用離心程序，提高重復實驗效率。
批量管理
提前準備多套平衡管和轉子，提高實驗通量。
溫控優(yōu)化
在樣品準備階段即可開啟制冷系統(tǒng)，減少等待時間。
快速校準
每周檢測一次轉速與溫度精度，保證離心效果一致性。
合理安排運行順序
將低溫樣品安排在前，高溫樣品在后，避免頻繁切換制冷模式。
避免連續(xù)超負荷運行：每次運行結束后間隔至少 10 分鐘。
保持良好通風：防止壓縮機過熱。
定期潤滑主軸：每三個月涂抹少量真空硅油。
防止化學腐蝕：禁止樣品外溢或使用強酸強堿溶液。
年度檢修：每12個月進行一次全面校準與維護。
| 故障現象 | 可能原因 | 解決方案 |
|---|---|---|
| 無法啟動 | 電源未接通或保險絲損壞 | 檢查插頭及更換保險絲 |
| 噪音過大 | 樣品不平衡或轉子安裝不牢 | 重新配平、檢查轉子鎖緊 |
| 溫度不下降 | 冷凝器堵塞 | 清潔通風口或聯系技術支持 |
| 報警代碼出現 | 系統(tǒng)檢測異常 | 查閱用戶手冊代碼解釋并排查 |
| 轉速偏差 | 電機控制誤差 | 重新校準轉速控制系統(tǒng) |
操作前必須熟悉緊急停止按鈕的位置。
禁止在運行中嘗試開蓋或移動設備。
處理生物危險樣品時，使用密封蓋并佩戴防護裝備。
發(fā)現液體滲漏或異味時立即停止使用。
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