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賽默飛（Thermo Fisher Scientific）BioMate 160 分光光度計(jì)是一款廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)、環(huán)境監(jiān)測(cè)、藥物檢測(cè)及教學(xué)實(shí)驗(yàn)的紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)。儀器操作簡(jiǎn)便，檢測(cè)結(jié)果穩(wěn)定，但要獲得準(zhǔn)確可靠的數(shù)據(jù)，必須嚴(yán)格遵循使用注意事項(xiàng)。本文將系統(tǒng)介紹從儀器準(zhǔn)備到維護(hù)全過(guò)程中的操作要點(diǎn)，幫助實(shí)驗(yàn)人員正確使用該設(shè)備，避免因操作不當(dāng)導(dǎo)致的誤差或故障。
溫度與濕度：實(shí)驗(yàn)室應(yīng)保持在 20–25 ℃，濕度控制在 40%–60%。溫濕度過(guò)高會(huì)影響光學(xué)元件穩(wěn)定性，過(guò)低則可能產(chǎn)生靜電干擾。
電源穩(wěn)定性：電壓要求 220 V±10%，應(yīng)避免電壓波動(dòng)過(guò)大，必要時(shí)使用穩(wěn)壓電源。
環(huán)境光控制：避免強(qiáng)光直射或強(qiáng)烈散射光，以減少光學(xué)干擾。
防塵與通風(fēng)：實(shí)驗(yàn)室應(yīng)清潔，儀器周?chē)３滞L(fēng)，避免灰塵進(jìn)入光學(xué)系統(tǒng)。
光源檢查：氘燈和鎢燈壽命有限，應(yīng)定期檢查亮度和穩(wěn)定性。
比色皿槽檢查：確保比色皿槽內(nèi)無(wú)異物和污漬。
開(kāi)機(jī)自檢：開(kāi)機(jī)后觀察自檢結(jié)果，確認(rèn)光源、檢測(cè)器和電路狀態(tài)正常。
溶液澄清度：樣品必須澄清透明，若有渾濁需離心或過(guò)濾。
濃度范圍：吸光度宜控制在 0.1–1.0 范圍，過(guò)高需稀釋。
對(duì)照液準(zhǔn)備：參比溶液與樣品溶劑必須一致，以保證校準(zhǔn)準(zhǔn)確。
避免氣泡：加樣時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡，否則會(huì)影響光路。
開(kāi)機(jī)后應(yīng)先選擇所需光源，并預(yù)熱 10–15 分鐘，使光源達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)。
不宜頻繁開(kāi)關(guān)光源，以延長(zhǎng)燈泡壽命。
波長(zhǎng)應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求準(zhǔn)確設(shè)定。
波長(zhǎng)校準(zhǔn)應(yīng)定期進(jìn)行，防止偏差導(dǎo)致測(cè)定誤差。
使用石英比色皿進(jìn)行紫外檢測(cè)，使用光學(xué)玻璃比色皿進(jìn)行可見(jiàn)光檢測(cè)。
比色皿外壁必須保持清潔，無(wú)指紋、水滴或劃痕。
比色皿放入時(shí)方向需保持一致，以減少光程差異造成的誤差。
在正式測(cè)定前必須進(jìn)行空白校準(zhǔn)。
校準(zhǔn)液體應(yīng)為與樣品相同的溶劑或緩沖液。
樣品應(yīng)迅速測(cè)定，避免因光照或氧化造成性質(zhì)改變。
對(duì)動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)，應(yīng)保持溫度恒定，保證曲線(xiàn)平滑。
多次測(cè)定時(shí)，樣品應(yīng)充分混勻后再取用，避免濃度不均。
對(duì)核酸和蛋白質(zhì)檢測(cè)，應(yīng)保證純度，避免鹽離子或有機(jī)物干擾。
對(duì)細(xì)胞懸液，應(yīng)在測(cè)定前輕輕混勻，避免沉降或團(tuán)聚。
每個(gè)樣品至少重復(fù)測(cè)量三次，取平均值。
在定量實(shí)驗(yàn)中，應(yīng)先繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，再對(duì)未知樣品進(jìn)行計(jì)算。
對(duì)酶動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)，應(yīng)設(shè)定合適的采樣間隔。
對(duì)核酸檢測(cè)，需同時(shí)記錄 A260、A280 和 A230，進(jìn)行純度判斷。
對(duì)蛋白質(zhì)檢測(cè)，若采用染料法，應(yīng)在合適波長(zhǎng)（如 595 nm）檢測(cè)。
對(duì)生長(zhǎng)曲線(xiàn)監(jiān)測(cè)，應(yīng)定時(shí)測(cè)量 OD600，避免過(guò)度稀釋或濃縮。
每次實(shí)驗(yàn)后，應(yīng)及時(shí)清理比色皿槽，避免殘留液體腐蝕。
比色皿應(yīng)用專(zhuān)用清潔液清洗，并避免接觸硬物劃傷。
光學(xué)窗口應(yīng)用無(wú)塵布輕拭，嚴(yán)禁使用粗糙紙巾。
光源燈泡壽命有限，氘燈一般 1000 小時(shí)左右，應(yīng)及時(shí)更換。
定期進(jìn)行波長(zhǎng)校正和光度校正，保證數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性。
定期檢查風(fēng)扇與散熱口，防止灰塵堵塞。
若儀器長(zhǎng)期停用，應(yīng)切斷電源，覆蓋防塵罩。
光源應(yīng)取下單獨(dú)保存，避免受潮或損壞。
吸光度異常偏高
預(yù)防：避免樣品過(guò)濃，確保比色皿干凈。
處理：適當(dāng)稀釋樣品并重新測(cè)定。
基線(xiàn)漂移
預(yù)防：保證光源充分預(yù)熱，保持比色皿清潔。
處理：重新進(jìn)行空白校準(zhǔn)。
重復(fù)性差
預(yù)防：規(guī)范操作，避免樣品分層。
處理：重新混勻樣品，多次取樣測(cè)定。
燈泡亮度不足
預(yù)防：減少頻繁開(kāi)關(guān)燈源。
處理：更換氘燈或鎢燈。
波長(zhǎng)偏差
預(yù)防：定期進(jìn)行校準(zhǔn)。
處理：聯(lián)系專(zhuān)業(yè)人員進(jìn)行維護(hù)。
操作人員需佩戴實(shí)驗(yàn)服、手套和護(hù)目鏡。
對(duì)含有有毒或強(qiáng)腐蝕性樣品，應(yīng)在通風(fēng)櫥內(nèi)操作。
樣品溢出應(yīng)立即清理，避免腐蝕比色皿或儀器。
每次測(cè)定應(yīng)詳細(xì)記錄波長(zhǎng)、樣品編號(hào)、吸光度值。
對(duì)關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)，應(yīng)保存光譜數(shù)據(jù)文件以便復(fù)查。
使用人員必須經(jīng)過(guò)培訓(xùn)，熟悉儀器原理與操作規(guī)程。
不得由未經(jīng)授權(quán)的人員私自操作或拆卸儀器。
注意比色皿使用石英材質(zhì)；
檢測(cè)前避免 RNA 降解；
A260/A280 比值應(yīng)在 1.8–2.0。
若采用紫外吸收法，避免緩沖液中含有吸收干擾物；
若采用染料法，應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)濃度范圍內(nèi)測(cè)定。
溫度控制至關(guān)重要；
實(shí)驗(yàn)過(guò)程中保持恒溫，避免反應(yīng)速率波動(dòng)。
在 OD600 測(cè)定時(shí)，必須輕柔混勻培養(yǎng)液；
防止細(xì)胞沉淀導(dǎo)致數(shù)據(jù)失真。
自動(dòng)化升級(jí)
與自動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng)結(jié)合，減少人工誤差。
信息化管理
數(shù)據(jù)可直接上傳至實(shí)驗(yàn)室管理系統(tǒng)，實(shí)現(xiàn)追溯與共享。
智能診斷
儀器具備自我診斷功能，自動(dòng)提醒光源壽命與校準(zhǔn)情況。
賽默飛分光光度計(jì) BioMate 160 在科研與教學(xué)中發(fā)揮著重要作用。要確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠，必須在 環(huán)境條件、樣品準(zhǔn)備、操作細(xì)節(jié)、維護(hù)保養(yǎng)、安全規(guī)范 等方面嚴(yán)格遵循使用注意事項(xiàng)。只有通過(guò)規(guī)范化管理和科學(xué)化操作，才能最大程度發(fā)揮該儀器的性能，為科研和應(yīng)用提供有力支持。
杭州實(shí)了個(gè)驗(yàn)生物科技有限公司
