賽默飛分光光度計BioMate 160操作步驟

一、引言

賽默飛BioMate 160分光光度計是一款高性能紫外-可見光分析儀器，廣泛應(yīng)用于核酸蛋白定量、藥物分析、環(huán)境監(jiān)測、食品檢測和材料研究等領(lǐng)域。為了保證檢測結(jié)果的準確性和操作過程的安全性，使用人員必須掌握系統(tǒng)、規(guī)范的操作步驟。本文將從操作準備、開機流程、樣品測定、數(shù)據(jù)處理、關(guān)機與維護等方面，全面介紹BioMate 160的操作流程，幫助實驗人員高效完成各類實驗。

二、操作前準備

1. 環(huán)境準備

• 實驗環(huán)境：儀器應(yīng)放置在穩(wěn)固的實驗臺上，遠離陽光直射與強磁場干擾。

• 溫濕度條件：建議溫度20–25℃，濕度40%–70%，避免過濕或過干對光學(xué)系統(tǒng)造成影響。

• 電源：使用220V ±10%的交流電，配合穩(wěn)壓電源，確保供電穩(wěn)定。

2. 儀器檢查

• 外觀檢查：確認設(shè)備外殼無裂痕、接口無松動，顯示屏無異常。

• 光源檢查：氘燈與鎢燈累計使用時間需記錄在冊，若接近壽命需提前更換。

• 樣品室檢查：內(nèi)部無液體殘留和灰塵，比色皿座清潔完整。

3. 實驗耗材與工具準備

• 標準比色皿或微量比色池。

• 待測樣品與空白對照溶液。

• 擦拭鏡頭紙與無水乙醇。

• 數(shù)據(jù)記錄本或外接電腦存儲介質(zhì)。

三、開機與初始化步驟

1. 開機流程

1. 接通電源，按下電源開關(guān)。

2. 設(shè)備自動進入自檢程序，顯示屏出現(xiàn)初始化界面。

3. 儀器預(yù)熱20–30分鐘，保證光源穩(wěn)定。

2. 系統(tǒng)設(shè)置

• 語言選擇：根據(jù)實驗室習(xí)慣選擇中文或英文操作界面。

• 日期與時間校正：確保數(shù)據(jù)記錄準確。

• 用戶登錄：若啟用分級權(quán)限，需輸入相應(yīng)賬號與密碼。

3. 波長校準

• 使用標準濾光片或氘燈發(fā)射線進行校準。

• 確保偏差小于±1 nm，否則需進行調(diào)整。

四、操作步驟詳解

1. 空白調(diào)零

• 將空白溶液加入比色皿，放置于樣品室。

• 選擇“空白”功能，系統(tǒng)自動記錄透過率或吸光度零點。

• 確保比色皿外壁干凈透明，避免影響光路。

2. 單波長測定

• 設(shè)置目標波長，例如260 nm測定核酸濃度。

• 插入樣品比色皿，儀器顯示吸光度或透過率值。

• 可選擇濃度計算模式，系統(tǒng)自動換算結(jié)果。

3. 全波長掃描

• 設(shè)定掃描范圍（如200–800 nm）。

• 設(shè)定步長（0.5–1 nm）與掃描速度。

• 啟動掃描，儀器繪制完整光譜曲線。

• 將結(jié)果保存至內(nèi)部存儲或?qū)С鲋镣獠吭O(shè)備。

4. 動力學(xué)實驗

• 設(shè)定目標波長與采樣時間間隔（如10秒/點）。

• 放入反應(yīng)體系樣品，啟動時間掃描。

• 儀器實時繪制吸光度隨時間變化曲線。

• 可自動計算初始速率、反應(yīng)常數(shù)等參數(shù)。

5. 定量分析

• 選擇定量功能，輸入標準曲線濃度與對應(yīng)吸光度。

• 系統(tǒng)自動生成回歸曲線（直線或多項式擬合）。

• 測定未知樣品吸光度后，儀器自動計算濃度結(jié)果。

6. 多波長測定

• 選擇多個波長（如260 nm與280 nm），分別測量樣品。

• 系統(tǒng)計算比值（如A260/A280），評估核酸或蛋白純度。

7. 差分光譜

• 同一樣品在兩種條件下測定吸收光譜。

• 選擇“差譜”功能，系統(tǒng)輸出差分結(jié)果。

• 可用于檢測弱吸收峰或環(huán)境變化對樣品的影響。

五、數(shù)據(jù)處理與輸出

1. 數(shù)據(jù)保存

• 實驗結(jié)果可保存于儀器內(nèi)置存儲器。

• 通過USB接口導(dǎo)出至U盤或電腦。

2. 數(shù)據(jù)分析

• 內(nèi)置軟件支持基線校正、平滑處理、峰值檢索等功能。

• 可生成表格、光譜圖，并進行統(tǒng)計計算。

3. 數(shù)據(jù)導(dǎo)出格式

• Excel、CSV、圖像格式均可導(dǎo)出。

• 支持與LIMS系統(tǒng)對接，便于實驗室數(shù)據(jù)管理。

六、操作后步驟

1. 樣品處理

• 移除比色皿，用去離子水清洗并擦干。

• 若使用了易污染的樣品，需用乙醇清洗樣品室。

2. 關(guān)機流程

• 在軟件中選擇“關(guān)機”命令，關(guān)閉光源。

• 待風扇停止后，關(guān)閉總電源。

• 覆蓋防塵罩，保持儀器清潔。

3. 日常維護

• 每次實驗后檢查樣品室和比色皿。

• 每周記錄光源使用時間，及時更換老化燈管。

• 定期進行波長和光度校準。

七、注意事項

1. 比色皿方向：刻度面始終朝向光源同一方向。

2. 光源預(yù)熱：氘燈至少需20分鐘預(yù)熱，否則會導(dǎo)致數(shù)據(jù)不穩(wěn)。

3. 溶液體積：液面高度必須高于光路，避免檢測失敗。

4. 避免振動：實驗過程中不得隨意移動儀器。

5. 定期維護：建議每年由廠家工程師進行一次全面保養(yǎng)。

八、常見操作問題及解決

1. 無法調(diào)零

• 檢查比色皿是否有水珠或污漬。

• 確認空白溶液是否新鮮。

2. 光譜異常噪聲

• 檢查光源是否接近壽命極限。

• 樣品室是否有灰塵或指紋污染。

3. 結(jié)果偏差大

• 核實標準曲線是否重新建立。

• 檢查樣品濃度是否超出檢測線性范圍。

4. 軟件卡頓

• 清理緩存或重啟儀器。

• 檢查USB接口是否穩(wěn)定。

九、總結(jié)

賽默飛BioMate 160分光光度計操作步驟主要包括：操作前準備—開機與初始化—樣品測定—數(shù)據(jù)處理—操作后維護五大環(huán)節(jié)。每一步都直接關(guān)系到實驗結(jié)果的準確性和設(shè)備的穩(wěn)定性。通過規(guī)范的操作，實驗人員不僅能高效完成測定，還能顯著延長儀器使用壽命。對于長期應(yīng)用該設(shè)備的實驗室，建立標準化操作流程和檢查表尤為重要，可進一步提升數(shù)據(jù)的可比性和實驗室管理水平。