伯樂(Bio-Rad)電穿孔儀165-2660是一款專為生物技術(shù)與分子生物學(xué)研究設(shè)計的高性能電轉(zhuǎn)化設(shè)備。該儀器通過瞬時高壓脈沖在細胞膜上形成可逆性孔洞,使外源核酸、蛋白質(zhì)或其他分子得以進入細胞內(nèi)部。憑借其穩(wěn)定的脈沖輸出、高精度控制和廣泛的參數(shù)適應(yīng)性,165-2660已成為各類實驗室、科研機構(gòu)和生物制藥企業(yè)的重要儀器。
其應(yīng)用范圍涵蓋細菌、酵母、真核細胞、植物原生質(zhì)體、動物組織及新興的基因與細胞治療領(lǐng)域。無論是在基礎(chǔ)研究還是產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用中,該設(shè)備都以高轉(zhuǎn)化效率、優(yōu)良重復(fù)性和安全可靠性受到科研人員的廣泛認可。
在分子克隆和基因工程研究中,大腸桿菌等細菌的質(zhì)粒轉(zhuǎn)化是基礎(chǔ)環(huán)節(jié)。傳統(tǒng)的化學(xué)法受菌株特性限制,而電穿孔技術(shù)突破了這一瓶頸。165-2660電穿孔儀能在短時間內(nèi)以2.0–2.5 kV的高電壓施加脈沖,使DNA分子高效穿透細菌細胞膜。
應(yīng)用實例:質(zhì)??寺?、基因文庫構(gòu)建、載體表達系統(tǒng)優(yōu)化。
優(yōu)勢特點:轉(zhuǎn)化效率高,單次實驗可達10? CFU/μg DNA;操作簡便,重復(fù)性優(yōu)良。
此外,針對難轉(zhuǎn)化的革蘭氏陽性菌,研究者可調(diào)整電場強度與時間常數(shù),實現(xiàn)更高DNA導(dǎo)入率,從而拓展電穿孔的適用范圍。
酵母細胞因其堅固的細胞壁而轉(zhuǎn)化困難,而165-2660強脈沖放電能夠有效突破這一障礙。通過合理控制電壓(1.0–1.5 kV)與電容(50 μF),可使細胞膜短暫開放并在隨后自我修復(fù),保證細胞活性。
該方法廣泛應(yīng)用于:
重組酵母構(gòu)建;
蛋白表達系統(tǒng)優(yōu)化;
代謝工程研究。
與化學(xué)轉(zhuǎn)化相比,電穿孔法能顯著提高外源DNA攝取率,尤其適用于工業(yè)發(fā)酵菌株的基因改造。
伯樂165-2660支持低電壓長脈沖模式,可實現(xiàn)哺乳動物細胞如HEK293、CHO、Jurkat等的高效電轉(zhuǎn)。該設(shè)備在基因表達研究、信號通路調(diào)控和細胞功能分析中表現(xiàn)出色。
典型條件:0.25–0.8 kV電壓、200–300 μF電容、脈沖1–2次。
應(yīng)用方向:基因表達驗證、RNA轉(zhuǎn)染、蛋白過表達與基因敲除實驗。
相比脂質(zhì)體或病毒轉(zhuǎn)染法,電穿孔具有操作簡潔、無免疫應(yīng)答風(fēng)險及高時效性的優(yōu)點。在臨床級研究中,它被用于外周血單核細胞(PBMC)及干細胞的非病毒基因轉(zhuǎn)染。
在細胞治療領(lǐng)域,165-2660電穿孔技術(shù)常用于導(dǎo)入基因編輯工具(如CRISPR/Cas9系統(tǒng)、siRNA、mRNA等)至干細胞或免疫細胞。
應(yīng)用實例:
CAR-T細胞構(gòu)建;
iPSC基因修飾;
免疫調(diào)控研究。
通過優(yōu)化電場強度與脈沖時間,可以在保持細胞活性的同時實現(xiàn)高效導(dǎo)入,是非病毒轉(zhuǎn)染策略的重要支撐技術(shù)。
165-2660廣泛應(yīng)用于植物基因工程中,尤其在植物原生質(zhì)體的DNA、RNA或蛋白質(zhì)導(dǎo)入方面具有突出效果。
電壓一般設(shè)定為0.6–1.0 kV,電容為1000 μF,通過精準(zhǔn)的脈沖控制,使植物細胞膜暫時開放而不影響后續(xù)再生。
應(yīng)用場景:
基因功能驗證;
植物基因編輯(CRISPR/Cas9);
RNA干擾實驗。
該技術(shù)特別適合水稻、煙草、擬南芥等模式植物,也可用于農(nóng)作物新品種改良與抗逆性研究。
在植物組織培養(yǎng)和細胞融合實驗中,電穿孔被用于促進原生質(zhì)體間的融合或外源基因整合。165-2660能穩(wěn)定輸出方波脈沖,電場均勻,有助于獲得高融合率與穩(wěn)定表達。
電穿孔技術(shù)是非病毒CRISPR遞送的核心方法之一。伯樂165-2660能精確控制電場參數(shù),使Cas9核蛋白復(fù)合物(RNP)快速進入細胞核內(nèi),實現(xiàn)高效的基因定點編輯。
適用對象:T細胞、干細胞、成纖維細胞、原代細胞。
主要優(yōu)點:
無基因組整合風(fēng)險;
操作周期短;
編輯效率高,誤差率低。
該應(yīng)用已成為現(xiàn)代細胞與基因治療研發(fā)的重要實驗環(huán)節(jié)。
在細胞治療領(lǐng)域,如CAR-T和TCR-T細胞制備過程中,165-2660被用于非病毒方式導(dǎo)入受體構(gòu)建元件或信號調(diào)控分子。電穿孔法避免了病毒包裝復(fù)雜性,降低了生物安全風(fēng)險,并大大縮短生產(chǎn)周期。
同時,在基因治療藥物開發(fā)中,該設(shè)備被用于篩選合適的導(dǎo)入條件,以平衡轉(zhuǎn)染效率與細胞生存率,為臨床轉(zhuǎn)化提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。
165-2660在蛋白質(zhì)工程中具有獨特價值。研究人員可通過電穿孔法將重組質(zhì)粒導(dǎo)入宿主細胞,進行蛋白表達與分泌優(yōu)化。
典型應(yīng)用:
抗體表達體系優(yōu)化;
酶工程研究;
重組疫苗生產(chǎn)。
此外,在合成生物學(xué)中,電穿孔可實現(xiàn)人工基因回路的導(dǎo)入與調(diào)控,是設(shè)計合成代謝途徑和構(gòu)建微生物工廠的關(guān)鍵手段。
通過調(diào)節(jié)時間常數(shù)與電場強度,科研人員可以針對不同宿主實現(xiàn)精準(zhǔn)控制,為生物制造和代謝優(yōu)化提供高效工具。
伯樂165-2660不僅適用于基因?qū)?,也能用于藥物分子、siRNA和寡核苷酸的遞送實驗。電穿孔產(chǎn)生的暫時孔道使得親水性分子可快速通過細胞膜,從而提高遞藥效率。
該技術(shù)常被用于研究藥物在細胞內(nèi)的分布機制、毒性反應(yīng)及代謝途徑分析。
在分子診斷和基因檢測領(lǐng)域,電穿孔被用于快速樣本裂解與核酸提取。通過優(yōu)化脈沖能量,可實現(xiàn)細胞或組織的溫和裂解,保持DNA完整性,為PCR、測序及實時定量檢測提供優(yōu)質(zhì)模板。
電穿孔法在DNA和mRNA疫苗開發(fā)中具有顯著優(yōu)勢。165-2660可在動物細胞或體外組織中促進核酸高效攝取,提高抗原蛋白的表達水平,從而增強免疫應(yīng)答。
在新型傳染病研究中,該設(shè)備被用于篩選疫苗載體與驗證表達系統(tǒng),是核酸疫苗技術(shù)鏈中的關(guān)鍵實驗設(shè)備。
通過電穿孔導(dǎo)入細胞因子基因或調(diào)控分子,可實現(xiàn)免疫細胞活性的調(diào)節(jié)。例如,在巨噬細胞、樹突狀細胞及T細胞中導(dǎo)入免疫調(diào)節(jié)因子基因,可用于研究免疫信號通路與抗腫瘤機制。
在工業(yè)發(fā)酵生產(chǎn)中,電穿孔被用于構(gòu)建高產(chǎn)菌株或優(yōu)化代謝途徑。165-2660穩(wěn)定的輸出特性保證了大規(guī)模轉(zhuǎn)化過程的可重復(fù)性,可廣泛應(yīng)用于抗生素、氨基酸、維生素及有機酸生產(chǎn)菌的改造。
在重組蛋白藥物生產(chǎn)中,哺乳細胞與酵母表達體系是主流途徑。165-2660能實現(xiàn)高效率的質(zhì)粒導(dǎo)入,確保目的蛋白高產(chǎn)表達并減少細胞損傷,從而降低生產(chǎn)成本并提高純化產(chǎn)量。
165-2660不僅是科研設(shè)備,也常用于高校教學(xué)與技能培訓(xùn)。由于操作簡便、安全可靠,適合實驗教學(xué)示范,如細胞轉(zhuǎn)化實驗、基因表達分析及生物工程課程實踐。通過電穿孔實驗,學(xué)生能夠直觀理解電場作用原理與分子導(dǎo)入機制,為培養(yǎng)科研技能提供實踐基礎(chǔ)。
隨著基因編輯、免疫療法及精準(zhǔn)醫(yī)療的發(fā)展,電穿孔技術(shù)的應(yīng)用范圍正持續(xù)擴大。伯樂165-2660作為高性能代表,未來在以下方向?qū)l(fā)揮更大作用:
高通量基因編輯平臺:與自動化系統(tǒng)結(jié)合,實現(xiàn)批量化電轉(zhuǎn)。
臨床級細胞制備系統(tǒng):支持GMP環(huán)境下的標(biāo)準(zhǔn)化操作。
智能參數(shù)優(yōu)化:通過軟件算法分析實驗數(shù)據(jù),自動推薦最佳電轉(zhuǎn)條件。
跨物種應(yīng)用:適用于微藻、昆蟲細胞及非模式生物的遺傳操作。
未來,電穿孔儀不僅是實驗設(shè)備,更是生命科學(xué)研究中連接基礎(chǔ)科學(xué)與應(yīng)用醫(yī)學(xué)的重要橋梁。
          
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