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質保3年只換不修，廠家長沙實了個驗儀器制造有限公司

一、前言

伯樂電穿孔儀 165-2661 是一款高性能電轉化儀器，廣泛應用于分子生物學、細胞工程、基因編輯及藥物遞送研究。
其核心功能是通過高壓瞬時脈沖改變細胞膜通透性，使外源 DNA、RNA 或蛋白質進入細胞內部。
為了確保實驗的成功率與安全性，操作人員需熟悉本儀器的操作步驟、參數(shù)設置原則及維護要求。

二、儀器結構與組成

1. 主機部分

• 高壓模塊：提供穩(wěn)定的脈沖電壓輸出，范圍 10–3500 V；

• 儲能電容：用于控制能量釋放速度與放電時間常數(shù)；

• 微處理控制單元：實現(xiàn)參數(shù)設定、自動檢測、波形控制；

• 散熱系統(tǒng)：保持儀器內部溫度穩(wěn)定，防止過熱；

• 控制面板：顯示電壓、電容、時間常數(shù)、放電模式與溫度信息。

2. ShockPod 電擊槽

• 與主機連接，用于容納電擊杯；

• 內設安全蓋鎖系統(tǒng)，未閉合時無法放電；

• 可適配 0.1 cm、0.2 cm、0.4 cm 電擊杯。

3. 電擊杯

• 兩電極間距決定電場強度；

• 材質為耐高壓聚碳酸酯或石英玻璃；

• 用于承載樣品，形成穩(wěn)定電場環(huán)境。

4. 連接線與安全配件

• 高壓導線連接主機與 ShockPod；

• 設有自動放電電阻與接地線，保障安全。

三、操作前準備

1. 環(huán)境要求

• 室溫 20–25 ℃，相對濕度 ≤ 70%；

• 環(huán)境應干燥、無強電磁干擾；

• 工作臺需絕緣、防靜電。

2. 電源與接地

• 使用 AC 220 V ±10%，50/60 Hz 電源；

• 儀器必須可靠接地，接地電阻 ≤ 1 Ω；

• 禁止共用大功率設備插座。

3. 儀器檢查

• 檢查電擊槽、ShockPod 內部是否干凈；

• 電擊杯無裂紋、干燥無水跡；

• 電纜接口牢固無松動；

• 面板顯示與按鍵響應正常。

4. 樣品準備

1. 細胞狀態(tài)：取對數(shù)生長期細胞；

2. 緩沖液：去離子水或低離子緩沖體系（電導率 0.5–1.5 mS/cm）；

3. 外源分子：DNA、RNA 或蛋白質純度高、無鹽；

4. 混合比例：一般 DNA 加入量為 0.1–5 μg / 每 100 μL 樣品；

5. 預冷：樣品及電擊杯預冷至 0–4 ℃ 以減少熱效應。

四、儀器啟動與界面操作

1. 開機自檢

接通電源后，系統(tǒng)自動檢測電壓模塊、電容模塊、蓋鎖傳感器及溫控狀態(tài)。
若顯示 “SELF TEST PASSED”，表示儀器可正常運行。

2. 主界面功能

屏幕顯示包括：

• Voltage（設定電壓）

• Capacitance（電容）

• Resistance（電阻）

• Time Constant（時間常數(shù)）

• Pulse Mode（波形模式）

• Status（運行狀態(tài)）

通過旋鈕選擇參數(shù)，按“ENTER”確認。

五、參數(shù)設置

1. 電壓設定

• 范圍：10–3500 V；

• 細菌體系：1800–2500 V；

• 酵母體系：1200–1600 V；

• 動物細胞：400–800 V；

• 植物原生質體：600–900 V。

2. 電容設定

• 范圍：25–3275 μF；

• 電容越大，放電時間越長；

• 一般推薦時間常數(shù) τ = 4–8 ms；

• 細菌多用 25 μF，哺乳動物細胞 500–1000 μF。

3. 電阻與波形

• 電阻：50–600 Ω，可自動匹配；

• 波形：指數(shù)衰減波或方波，按實驗體系選擇；

• 脈沖次數(shù)：1–10 次，間隔 0.5–2 秒。

4. 參數(shù)保存

設置完畢后選擇 “SAVE PROTOCOL”，輸入方案編號并保存，便于下次調用。

六、電擊操作流程

步驟 1：樣品裝入電擊杯

• 取 0.1–0.4 cm 間距的電擊杯；

• 將樣品加入，不超過最大容量的 80%；

• 去除氣泡，以免電弧；

• 蓋上蓋子并放入 ShockPod 槽內。

步驟 2：蓋鎖檢測

合上蓋子，儀器檢測蓋鎖狀態(tài)并提示 “LID CLOSED – READY”。
未鎖定時禁止放電。

步驟 3：放電執(zhí)行

1. 按 “PULSE” 鍵充電；

2. 當屏幕提示 “READY TO PULSE” 時按 “ENTER”；

3. 儀器釋放高壓脈沖，同時記錄實際電壓與時間常數(shù)；

4. 放電完成后提示 “COMPLETE”；

5. 系統(tǒng)自動放電并冷卻。

步驟 4：樣品回收

等待 10 秒確認無殘余電荷；
取出電擊杯，立即將樣品轉入恢復液或培養(yǎng)基中；
輕輕混勻后按實驗需求培養(yǎng)。

七、不同體系的操作參數(shù)參考

以上參數(shù)為參考值，可根據(jù)細胞種類、電導率與樣品濃度微調。

八、實驗后處理

1. 細菌與酵母

• 放電后立即加入 1 mL 預溫培養(yǎng)液；

• 30–60 分鐘恢復；

• 涂布平板培養(yǎng)。

2. 動物細胞

• 轉入含血清培養(yǎng)基；

• 37 ℃、5% CO? 條件下培養(yǎng)；

• 1–2 小時后更換新鮮培養(yǎng)基。

3. 植物原生質體

• 放電后轉入含甘露醇的緩沖液；

• 靜置 1 小時后進行培養(yǎng)或分析。

九、實驗數(shù)據(jù)記錄

1. 自動記錄

儀器自動保存以下數(shù)據(jù)：

• 設定與實際電壓；

• 時間常數(shù) τ；

• 放電次數(shù)與波形類型；

• 能量釋放百分比；

• 電容、電阻值。

2. 數(shù)據(jù)導出

通過 USB 接口導出 CSV 文件，包含每次實驗的運行參數(shù)與時間戳。

3. 實驗報告

建議操作員在實驗日志中記錄：

• 樣品編號與體系類型；

• 參數(shù)組合；

• 成功率、存活率與異常情況。

十、安全操作規(guī)范

1. 操作前必須閱讀使用說明；

2. 放電過程中嚴禁觸摸電極與 ShockPod；

3. 電擊杯樣品體積不得超過推薦上限；

4. 使用去鹽樣品，防止電??；

5. 每次放電后等待 10 秒，確認放電完畢；

6. 實驗區(qū)保持干燥，防止漏電；

7. 出現(xiàn)閃光、異味、異常響聲時立即斷電。

十一、常見錯誤與排查

十二、維護與保養(yǎng)

1. 日常保養(yǎng)

• 實驗結束后關閉電源，拔掉插頭；

• 清潔 ShockPod 與電擊杯；

• 檢查電纜與接地是否牢固；

• 用無水乙醇擦拭機身。

2. 定期維護

• 每 3 個月校準電壓與電容模塊；

• 每 6 個月清理散熱風扇；

• 每年進行一次全面性能檢測。

3. 電擊杯保養(yǎng)

• 不得用金屬刷清潔；

• 每次使用后立即沖洗并風干；

• 如出現(xiàn)變色或裂紋需更換。

十三、注意事項總結

1. 樣品電導率對放電特性影響顯著；

2. 電壓、電容與時間常數(shù)必須協(xié)調；

3. 溫度過高會導致細胞死亡，應適度冷卻；

4. 避免頻繁連續(xù)放電，間隔 ≥ 10 秒；

5. 校準與維護必須由專業(yè)技術人員執(zhí)行。

十四、應急處理

1. 電擊未完成：

• 檢查電壓是否達到設定值；

• 查看蓋鎖狀態(tài)。

2. 電弧或短路：

• 立即斷電；

• 清理殘留樣品并檢查電極。

3. 儀器報警：

• 讀取錯誤代碼；

• 對照維修手冊進行處理。

4. 人身安全：

• 若發(fā)生觸電，應立即切斷電源并實施急救。

十五、結果評估與優(yōu)化

1. 評估指標

• 轉化效率；

• 存活率；

• 時間常數(shù)與電壓一致性；

• 重復性（偏差 ≤ ±10%）。

2. 優(yōu)化策略

• 調整電容與電壓組合；

• 使用適合的電擊杯間距；

• 優(yōu)化細胞濃度與預冷時間；

• 控制緩沖液離子強度。

3. 結果穩(wěn)定性驗證
   連續(xù) 5 次實驗，轉化效率波動不超過 15%，視為系統(tǒng)穩(wěn)定。

十六、長期使用與存儲

1. 長期不使用時，斷電并拔除電源線；

2. 存放環(huán)境溫度 10–35 ℃、濕度 ≤ 70%；

3. 不得放置于陽光直射或強腐蝕氣體環(huán)境；

4. 電擊杯與 ShockPod 分開存放，使用防潮袋密封；

5. 定期開機自檢，防止電容老化。

十七、培訓與操作資格

• 操作員須經(jīng)過實驗室安全培訓；

• 熟悉設備結構與參數(shù)調節(jié)邏輯；

• 每年至少參加一次設備維護與安全復訓；

• 實驗記錄需經(jīng)技術負責人審核。