質(zhì)保3年只換不修,廠家長(zhǎng)沙實(shí)了個(gè)驗(yàn)儀器制造有限公司。
伯樂(lè)(Bio-Rad)Genepulser Xcell電穿孔儀是用于細(xì)胞轉(zhuǎn)化、基因?qū)牒碗娹D(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)的先進(jìn)設(shè)備。電穿孔技術(shù)通過(guò)高壓脈沖的方式,短時(shí)間內(nèi)使細(xì)胞膜形成微孔,允許外源物質(zhì)如DNA、RNA、蛋白質(zhì)等進(jìn)入細(xì)胞。這項(xiàng)技術(shù)在分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)以及基因工程領(lǐng)域有著廣泛應(yīng)用,尤其在基因編輯、細(xì)胞治療以及重組蛋白生產(chǎn)等方面發(fā)揮著重要作用。
Genepulser Xcell憑借其精確的電容調(diào)節(jié)、智能的脈沖控制系統(tǒng)以及高度的操作便利性,已經(jīng)成為各大實(shí)驗(yàn)室必不可少的工具。本篇將系統(tǒng)介紹伯樂(lè)Genepulser Xcell電穿孔儀的使用方法,從設(shè)備的基本結(jié)構(gòu)、操作步驟到安全操作規(guī)范、常見(jiàn)問(wèn)題解決等方面進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明,幫助用戶高效、安全地進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。
主機(jī)是整個(gè)電穿孔系統(tǒng)的核心,負(fù)責(zé)所有脈沖信號(hào)的生成與控制。主機(jī)上配有顯示屏、操作按鈕、以及接口端口,用于設(shè)置實(shí)驗(yàn)參數(shù)、監(jiān)控設(shè)備狀態(tài)及數(shù)據(jù)記錄。顯示屏上可以實(shí)時(shí)顯示電壓、電流、脈沖時(shí)間等重要信息,幫助用戶確保實(shí)驗(yàn)過(guò)程的準(zhǔn)確性。
電容模塊負(fù)責(zé)存儲(chǔ)電能,而電阻模塊則調(diào)節(jié)放電速度和波形。用戶可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,通過(guò)設(shè)置適當(dāng)?shù)碾娙菖c電阻值來(lái)控制脈沖的幅度、持續(xù)時(shí)間和形態(tài),從而優(yōu)化電穿孔效果。
電極系統(tǒng)包括電穿孔杯與電極座,是與細(xì)胞樣品接觸的部分。電極的材質(zhì)多為鉑合金,具備較好的導(dǎo)電性與耐腐蝕性。電極的間距通常為0.1 cm、0.2 cm和0.4 cm,用戶可以根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型的不同選擇合適的電極。
Genepulser Xcell電穿孔儀內(nèi)置溫控模塊,用于監(jiān)控電極和樣品區(qū)的溫度。溫控系統(tǒng)能有效避免因溫度過(guò)高導(dǎo)致細(xì)胞損傷,并保持實(shí)驗(yàn)的高效性。溫度變化會(huì)直接影響細(xì)胞膜的通透性,因此良好的溫度控制至關(guān)重要。
儀器配備的顯示屏不僅可以顯示實(shí)時(shí)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),還可以保存實(shí)驗(yàn)記錄,生成實(shí)驗(yàn)報(bào)告,并支持?jǐn)?shù)據(jù)導(dǎo)出。系統(tǒng)可通過(guò)USB接口與電腦連接,方便數(shù)據(jù)的管理與后續(xù)分析。
檢查環(huán)境:確保實(shí)驗(yàn)臺(tái)面平整、設(shè)備無(wú)損壞,并且周?chē)h(huán)境干凈、通風(fēng)良好。
電源連接:檢查電源線是否完好,插入電源并打開(kāi)電源開(kāi)關(guān)。確保主機(jī)正確接地,避免電擊風(fēng)險(xiǎn)。
檢查電極:檢查電極是否清潔、完好。如果有污漬、腐蝕或裂紋,需更換新的電極。
樣品準(zhǔn)備:根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求準(zhǔn)備細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度一般應(yīng)在1×10?個(gè)/mL左右。使用專(zhuān)用電穿孔緩沖液,如低導(dǎo)電PBS或特定實(shí)驗(yàn)要求的緩沖液。
根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇合適間距的電極(0.1 cm、0.2 cm或0.4 cm)。
將電穿孔杯清洗干凈,確保內(nèi)部沒(méi)有氣泡,液體體積合適。
將電穿孔杯放入電極架,確保液面完全覆蓋電極。輕輕敲擊杯體底部去除氣泡。
打開(kāi)設(shè)備并進(jìn)入“Parameter Setting”菜單。
選擇模式:根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇合適的脈沖模式(指數(shù)衰減波、方波、雙脈沖等)。
設(shè)置電壓:輸入所需的電壓范圍(一般為50 V–2500 V)。電壓的選擇依據(jù)細(xì)胞類(lèi)型和轉(zhuǎn)化目標(biāo)而定。
設(shè)置電容:設(shè)置適當(dāng)?shù)碾娙葜担?5 μF至3300 μF),電容大小直接影響放電的持續(xù)時(shí)間和能量輸出。
設(shè)置電阻:根據(jù)電壓和電容的配合設(shè)置電阻值。常見(jiàn)的電阻值范圍為100 Ω至2000 Ω,通常選擇較低電阻來(lái)加快電場(chǎng)釋放。
設(shè)置脈沖時(shí)間:根據(jù)樣品類(lèi)型選擇脈沖持續(xù)時(shí)間,時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞損傷,而時(shí)間過(guò)短則可能不足以形成有效的孔洞。
按下“Charge”按鈕,啟動(dòng)電容充電程序,顯示屏?xí)?shí)時(shí)顯示充電進(jìn)度,充電完成后系統(tǒng)提示“Ready”。
確認(rèn)設(shè)備各項(xiàng)參數(shù)正確后,按下“Pulse”按鈕開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。此時(shí),電容模塊釋放電能,電極釋放高壓脈沖,電流通過(guò)樣品懸液,瞬時(shí)形成細(xì)胞膜的孔洞。
在脈沖過(guò)程中,顯示屏上會(huì)顯示電壓、電流、時(shí)間常數(shù)等數(shù)據(jù),實(shí)時(shí)監(jiān)控實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。
脈沖結(jié)束后,系統(tǒng)會(huì)顯示“Complete”并自動(dòng)停止放電。
取下電穿孔杯,將樣品轉(zhuǎn)移至適當(dāng)?shù)娜萜髦羞M(jìn)行復(fù)蘇。
立即加入預(yù)溫的培養(yǎng)基或復(fù)蘇液,在適當(dāng)溫度下恢復(fù)細(xì)胞。
操作時(shí)佩戴絕緣手套:避免直接接觸電極及電源接口。
檢查設(shè)備接地:確保設(shè)備正確接地,避免電擊事故。
不得在高壓脈沖放電時(shí)觸碰設(shè)備:放電時(shí)操作人員應(yīng)遠(yuǎn)離設(shè)備。
不私自拆卸設(shè)備:電穿孔儀包含高壓組件,私自拆卸可能導(dǎo)致設(shè)備損壞或人員傷害。
防火安全:確保操作環(huán)境沒(méi)有易燃物,避免火災(zāi)事故。
避免水源接觸:避免電穿孔儀接觸水或濕氣,以防電路短路。
通風(fēng)良好:實(shí)驗(yàn)室內(nèi)保持適當(dāng)?shù)耐L(fēng),防止高溫或氣體聚集。
生物安全:在操作涉及危險(xiǎn)基因或病原體的樣品時(shí),應(yīng)在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。
廢棄物處理:所有廢棄細(xì)胞及實(shí)驗(yàn)耗材應(yīng)進(jìn)行高壓滅菌處理后處置。
| 問(wèn)題 | 可能原因 | 解決方法 | 
|---|---|---|
| 電容充電緩慢或無(wú)法充電 | 電源電壓不足或電極連接不良 | 檢查電源連接,確認(rèn)電極安裝正確 | 
| 電弧放電或異常噪音 | 電極接觸不良或氣泡 | 確認(rèn)電極清潔,重新裝樣,去除氣泡 | 
| 輸出電壓不穩(wěn)定 | 電源模塊故障或電極老化 | 檢查電源模塊,嘗試更換電極 | 
| 屏幕顯示溫度異常 | 散熱系統(tǒng)故障或環(huán)境過(guò)熱 | 清潔風(fēng)扇,檢查設(shè)備環(huán)境溫度 | 
| 樣品存活率低 | 脈沖時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或電壓過(guò)高 | 調(diào)整脈沖參數(shù),縮短放電時(shí)間,降低電壓 | 
每次實(shí)驗(yàn)后清潔電極、樣品杯及操作面板。
定期檢查設(shè)備電源線、連接線、插座接口等,確保無(wú)損壞或松動(dòng)。
定期清潔設(shè)備散熱系統(tǒng),防止積塵影響設(shè)備散熱。
每3–6個(gè)月對(duì)電壓、電流、電容等參數(shù)進(jìn)行一次校準(zhǔn),確保實(shí)驗(yàn)精度。
使用原廠提供的標(biāo)準(zhǔn)校準(zhǔn)設(shè)備進(jìn)行校準(zhǔn)。
長(zhǎng)時(shí)間不使用時(shí),應(yīng)將設(shè)備存放在干燥、通風(fēng)的地方,避免潮濕影響電路。
保持設(shè)備關(guān)閉狀態(tài),避免長(zhǎng)時(shí)間處于待機(jī)狀態(tài)。
清潔后將設(shè)備封存并保持儀器表面干凈。
伯樂(lè)Genepulser Xcell電穿孔儀通過(guò)精密的電容、電阻和脈沖控制系統(tǒng),為基因?qū)肱c細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)提供了高效、安全的解決方案。嚴(yán)格遵守操作規(guī)范、定期進(jìn)行設(shè)備維護(hù)以及安全操作規(guī)范的執(zhí)行,能夠有效提高實(shí)驗(yàn)成功率,并延長(zhǎng)設(shè)備使用壽命。通過(guò)合理設(shè)置電壓、電容、電阻等參數(shù),用戶能夠根據(jù)不同細(xì)胞類(lèi)型和實(shí)驗(yàn)需求,靈活調(diào)整設(shè)備性能,以獲得最佳的轉(zhuǎn)化效果。
質(zhì)保3年只換不修的服務(wù)保證了設(shè)備的長(zhǎng)期穩(wěn)定運(yùn)行,用戶可放心進(jìn)行各類(lèi)電穿孔實(shí)驗(yàn)。隨著生物技術(shù)的不斷發(fā)展,Genepulser Xcell電穿孔儀將繼續(xù)在基因編輯、細(xì)胞治療等前沿領(lǐng)域發(fā)揮重要作用。
          
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