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質(zhì)保3年只換不修，廠家長(zhǎng)沙實(shí)了個(gè)驗(yàn)儀器制造有限公司

一、儀器簡(jiǎn)介

伯樂(lè)電穿孔儀 165-2660 是一款高性能的基因?qū)肱c電轉(zhuǎn)化設(shè)備，用于細(xì)菌、酵母、植物原生質(zhì)體及真核細(xì)胞的電穿孔實(shí)驗(yàn)。該儀器通過(guò)瞬間高壓脈沖作用于細(xì)胞膜，使膜結(jié)構(gòu)產(chǎn)生可逆性微孔，從而實(shí)現(xiàn)外源 DNA、RNA 或蛋白質(zhì)的導(dǎo)入。

設(shè)備具備高精度的電壓控制、可調(diào)波形輸出、自動(dòng)檢測(cè)與數(shù)據(jù)記錄功能，適合科研實(shí)驗(yàn)室、醫(yī)藥研發(fā)機(jī)構(gòu)及教學(xué)單位使用。其操作簡(jiǎn)便、重復(fù)性高、安全防護(hù)完善，是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的關(guān)鍵儀器之一。

二、工作原理概述

電穿孔的基本原理是利用高壓脈沖在細(xì)胞膜上產(chǎn)生電場(chǎng)梯度，使細(xì)胞膜局部破裂形成可逆微孔。當(dāng)外源分子處于電場(chǎng)中時(shí)，在電驅(qū)動(dòng)作用下進(jìn)入細(xì)胞。隨后，電場(chǎng)移除，細(xì)胞膜自然修復(fù)，外源分子留存在細(xì)胞內(nèi)，實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)染或轉(zhuǎn)化。

伯樂(lè)電穿孔儀 165-2660 采用高壓儲(chǔ)能電容與高速放電開(kāi)關(guān)技術(shù)，通過(guò)控制放電電壓、電容容量、脈沖時(shí)間等參數(shù)實(shí)現(xiàn)不同類(lèi)型的電場(chǎng)波形，包括指數(shù)衰減波和方波兩種主要模式。

三、設(shè)備組成與功能

1. 主控單元

主機(jī)負(fù)責(zé)控制電壓輸出、參數(shù)設(shè)定與能量管理。內(nèi)置微處理系統(tǒng)可進(jìn)行自動(dòng)檢測(cè)與數(shù)據(jù)存儲(chǔ)。

2. ShockPod 電擊槽

用于放置電擊杯并傳遞高壓脈沖信號(hào)。內(nèi)置安全閉鎖系統(tǒng)，當(dāng)蓋未閉合時(shí)，儀器無(wú)法執(zhí)行放電。

3. CE 模塊（電容擴(kuò)展模塊）

用于擴(kuò)展放電電容值，適合指數(shù)衰減波操作，可調(diào)整時(shí)間常數(shù)與能量釋放速率。

4. PC 模塊（脈沖控制模塊）

控制方波輸出、電阻負(fù)載與脈沖次數(shù)，適用于真核細(xì)胞或多脈沖實(shí)驗(yàn)。

5. 電擊杯

三種規(guī)格：0.1 cm、0.2 cm 和 0.4 cm，用于不同細(xì)胞類(lèi)型。杯體采用絕緣塑料，電極鍍金處理，導(dǎo)電均勻且抗腐蝕。

四、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備

1. 環(huán)境與電源要求

• 環(huán)境溫度保持在 20–25 ℃，濕度 ≤ 80%。

• 使用獨(dú)立接地插座，電源電壓為 220 V ±10%。

• 工作臺(tái)干燥、防震、遠(yuǎn)離金屬導(dǎo)體與易燃物。

• 保證儀器后方通風(fēng)良好，不可堵塞散熱口。

2. 儀器檢查

1. 檢查電源線(xiàn)及高壓線(xiàn)纜是否完好。

2. 確認(rèn) ShockPod 蓋鎖結(jié)構(gòu)正常。

3. 檢查電擊杯無(wú)裂紋與液體殘留。

4. 模塊插入牢固，主機(jī)處于“OFF”狀態(tài)。

5. 打開(kāi)電源后進(jìn)行自檢，屏幕顯示 “READY” 方可操作。

3. 樣品準(zhǔn)備

• 選取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，活性高、狀態(tài)良好。

• 用低離子強(qiáng)度緩沖液洗滌 2–3 次，去除培養(yǎng)基中的鹽分。

• 調(diào)整細(xì)胞濃度至 1×10?–1×10? cells/mL。

• 將 DNA、RNA 或質(zhì)粒溶液加入細(xì)胞懸液中，輕輕混勻。

• 將混合液預(yù)冷 5 分鐘，以降低電擊熱效應(yīng)。

五、設(shè)備安裝與連接

1. 將主機(jī)置于平穩(wěn)臺(tái)面。

2. 插入 ShockPod 電擊槽至前端接口并鎖定。

3. 若使用 CE 或 PC 模塊，在斷電狀態(tài)下插入后端擴(kuò)展接口。

4. 連接電源線(xiàn)并接地。

5. 打開(kāi)電源開(kāi)關(guān)，待儀器完成自檢。

設(shè)備自檢內(nèi)容包括電源穩(wěn)定性、電壓模塊功能、溫度狀態(tài)和接口檢測(cè)。若屏幕出現(xiàn)錯(cuò)誤提示，應(yīng)立即斷電檢查。

六、參數(shù)設(shè)置方法

1. 進(jìn)入操作模式

開(kāi)機(jī)后主界面顯示三種模式選項(xiàng)：

• Preset Protocol（預(yù)設(shè)程序）：系統(tǒng)內(nèi)置常見(jiàn)細(xì)胞類(lèi)型參數(shù)。

• Manual Setup（手動(dòng)設(shè)置）：用戶(hù)可自定義電壓、電容、電阻、波形等。

• User Program（用戶(hù)程序）：調(diào)用或保存自定義參數(shù)。

通過(guò)方向鍵選擇模式后按 “ENTER” 進(jìn)入設(shè)置界面。

2. 波形選擇

兩種可選波形：

• 指數(shù)衰減波（Exponential Decay）：適用于細(xì)菌、酵母、植物原生質(zhì)體。

• 方波（Square Wave）：適用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞及多脈沖轉(zhuǎn)染。

3. 電壓設(shè)置

• 電壓范圍：10–3000 V。

• 調(diào)整步進(jìn)：1 V。

• 常見(jiàn)設(shè)定：

• 細(xì)菌：1800–2500 V

• 酵母：1000–1500 V

• 哺乳動(dòng)物細(xì)胞：300–800 V

通過(guò)上下鍵調(diào)節(jié)后按 “ENTER” 確認(rèn)。

4. 電容、電阻與脈沖時(shí)間

對(duì)于多脈沖模式，可設(shè)置脈沖次數(shù)（1–10 次）及間隔時(shí)間（1–10 秒）。

5. 程序保存與調(diào)用

設(shè)定完成后可按 “SAVE” 保存為用戶(hù)程序，系統(tǒng)自動(dòng)分配編號(hào)?？呻S時(shí)通過(guò) “LOAD” 調(diào)用歷史參數(shù)。

七、裝樣與放電操作

1. 裝樣步驟

1. 將樣品 100–400 μL 加入電擊杯中。

2. 檢查液面平整、無(wú)氣泡。

3. 將電擊杯水平放入 ShockPod 電擊槽。

4. 蓋上安全蓋，等待屏幕顯示 “Cuvette Ready”。

2. 放電操作

1. 按 “PULSE” 鍵進(jìn)入充電狀態(tài)，系統(tǒng)提示 “CHARGING”。

2. 當(dāng)提示 “READY TO PULSE” 時(shí)，按確認(rèn)鍵開(kāi)始放電。

3. 放電瞬間完成，屏幕顯示電壓曲線(xiàn)及時(shí)間常數(shù)。

4. 放電后等待系統(tǒng)顯示 “COMPLETE”，再取出電擊杯。

注意：放電過(guò)程中嚴(yán)禁觸碰儀器及電擊槽，以防高壓傷害。

3. 樣品回收

• 放電完成后立即將樣品轉(zhuǎn)移至恢復(fù)培養(yǎng)基中。

• 細(xì)菌恢復(fù)時(shí)間約 30 分鐘，哺乳動(dòng)物細(xì)胞 1–2 小時(shí)。

• 若液體溢出，應(yīng)及時(shí)擦拭 ShockPod 內(nèi)壁并保持干燥。

八、數(shù)據(jù)記錄與分析

放電結(jié)束后，儀器自動(dòng)生成實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)：

• 輸出電壓

• 時(shí)間常數(shù)（τ）

• 樣品電阻

• 能量釋放百分比

數(shù)據(jù)可存儲(chǔ)在內(nèi)部存儲(chǔ)區(qū)或?qū)С鲋镣獠吭O(shè)備（USB 接口）。
建議用戶(hù)建立實(shí)驗(yàn)記錄表，記錄樣品類(lèi)型、參數(shù)設(shè)置及結(jié)果，以便優(yōu)化條件。

九、實(shí)驗(yàn)后操作

1. 關(guān)閉電源開(kāi)關(guān)并拔下電源線(xiàn)。

2. 等待 10 秒，確保電容完全放電。

3. 用無(wú)離子水沖洗電擊杯，晾干備用。

4. 檢查 ShockPod 是否有液體殘留，用干布擦拭。

5. 用柔軟布擦拭儀器外殼，保持清潔。

6. 覆蓋防塵罩，放置于干燥環(huán)境中。

十、常見(jiàn)問(wèn)題與排查方法

十一、安全注意事項(xiàng)

1. 操作人員必須經(jīng)過(guò)高壓設(shè)備使用培訓(xùn)。

2. 禁止在潮濕或?qū)щ姳砻嫔鲜褂脙x器。

3. 放電過(guò)程中不得打開(kāi) ShockPod 蓋。

4. 嚴(yán)禁使用破裂或污染的電擊杯。

5. 電源線(xiàn)、接地線(xiàn)保持良好，禁止私自更換插頭。

6. 若出現(xiàn)異味、煙霧或異常聲響，應(yīng)立即斷電。

7. 不得將金屬物體接觸儀器接口。

8. 使用完畢后確認(rèn)完全斷電再清潔。

十二、性能優(yōu)化建議

1. 溫度控制

• 電穿孔操作前可將樣品及電擊杯置于冰上預(yù)冷 5 分鐘，減少熱損傷。

2. 緩沖液優(yōu)化

• 使用低離子強(qiáng)度緩沖液（如無(wú)鈣無(wú)鎂 PBS 或?qū)Ｓ?electroporation buffer）。

3. 電壓梯度法

• 新細(xì)胞類(lèi)型可從低電壓逐級(jí)提升，找到最佳條件。

4. 重復(fù)性檢測(cè)

• 每種參數(shù)至少重復(fù) 3 次，以確保結(jié)果穩(wěn)定。

5. 數(shù)據(jù)分析

• 對(duì)比轉(zhuǎn)化效率與細(xì)胞存活率，確定最佳脈沖組合。

十三、維護(hù)與保養(yǎng)

1. 每次使用后清潔儀器表面與電擊槽。

2. 定期檢查風(fēng)扇運(yùn)行是否正常。

3. 每三個(gè)月進(jìn)行一次電壓輸出校準(zhǔn)。

4. 定期清理模塊接口，防止灰塵積聚。

5. 長(zhǎng)期不使用時(shí)每月通電 5 分鐘以保持電容活性。

6. 電擊杯建議使用 2–3 次后更換。

十四、質(zhì)保與售后

伯樂(lè)電穿孔儀 165-2660 由長(zhǎng)沙實(shí)了個(gè)驗(yàn)儀器制造有限公司生產(chǎn)，提供 三年質(zhì)保，只換不修 服務(wù)。
在質(zhì)保期內(nèi)，如出現(xiàn)性能故障或輸出異常，可聯(lián)系廠家技術(shù)支持更換整機(jī)或模塊。
用戶(hù)不得自行拆機(jī)維修，避免失去質(zhì)保資格。

十五、實(shí)驗(yàn)安全與應(yīng)急處理

1. 若操作過(guò)程中發(fā)生電弧閃光，應(yīng)立即停止實(shí)驗(yàn)并斷電。

2. 若液體進(jìn)入設(shè)備內(nèi)部，應(yīng)拔掉插頭并用干布擦拭。

3. 若人員觸電，應(yīng)立刻切斷電源并實(shí)施急救。

4. 若設(shè)備冒煙或發(fā)熱異常，使用二氧化碳滅火器，不可用水。

5. 操作結(jié)束后，應(yīng)填寫(xiě)設(shè)備使用日志，記錄狀態(tài)與參數(shù)。