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伯樂(lè)(Bio-Rad)Genepulser Xcell 電穿孔儀是一款高性能的生物電轉(zhuǎn)化設(shè)備,廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)、細(xì)胞工程、基因編輯、疫苗研究、藥物篩選及農(nóng)業(yè)生物技術(shù)等領(lǐng)域。它通過(guò)精確控制高壓脈沖電場(chǎng),使細(xì)胞膜在極短時(shí)間內(nèi)形成可逆性微孔,從而實(shí)現(xiàn)外源核酸或蛋白質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的目的。該技術(shù)克服了傳統(tǒng)化學(xué)轉(zhuǎn)化方法的局限,具有操作簡(jiǎn)便、適應(yīng)性強(qiáng)、效率高和細(xì)胞損傷小等顯著優(yōu)勢(shì)。
Genepulser Xcell 電穿孔儀不僅在科研實(shí)驗(yàn)室中被廣泛采用,也是生物制藥企業(yè)和生物工程生產(chǎn)線的重要工具。其可編程控制系統(tǒng)和可調(diào)電場(chǎng)參數(shù),能夠滿足從原核生物到真核細(xì)胞的不同轉(zhuǎn)化需求,是連接基礎(chǔ)研究與應(yīng)用轉(zhuǎn)化的關(guān)鍵設(shè)備之一。
電穿孔技術(shù)基于細(xì)胞膜在強(qiáng)電場(chǎng)作用下形成暫時(shí)性納米級(jí)孔洞的原理。當(dāng)高壓脈沖施加于細(xì)胞懸液時(shí),細(xì)胞膜雙層磷脂分子發(fā)生重新排列,形成瞬時(shí)通道,外源物質(zhì)即可進(jìn)入胞內(nèi)。電場(chǎng)撤除后,細(xì)胞膜逐漸恢復(fù)完整性,從而實(shí)現(xiàn)基因、RNA 或蛋白質(zhì)的高效導(dǎo)入。
Genepulser Xcell 具備以下技術(shù)特性:
高精度電壓控制:電壓范圍廣(10V~2500V),適應(yīng)不同細(xì)胞類型。
可調(diào)脈沖參數(shù):時(shí)間、波形、電容、電阻可精確調(diào)節(jié)。
智能監(jiān)測(cè)系統(tǒng):實(shí)時(shí)顯示電流、電壓、溫度及能量輸出。
安全保護(hù)功能:具備電弧抑制、過(guò)流保護(hù)和溫度監(jiān)控。
數(shù)據(jù)記錄與導(dǎo)出:自動(dòng)保存實(shí)驗(yàn)參數(shù)與結(jié)果,便于統(tǒng)計(jì)與分析。
基于這些特性,Genepulser Xcell 的應(yīng)用范圍極其廣泛,涵蓋生命科學(xué)多個(gè)層面。
Genepulser Xcell 電穿孔儀可廣泛應(yīng)用于以下領(lǐng)域:
基因轉(zhuǎn)化與導(dǎo)入實(shí)驗(yàn)
哺乳動(dòng)物細(xì)胞轉(zhuǎn)染
原核細(xì)胞質(zhì)粒轉(zhuǎn)化
真核微生物轉(zhuǎn)化(如酵母與真菌)
植物原生質(zhì)體基因?qū)?/strong>
細(xì)胞融合與雜交瘤制備
蛋白質(zhì)、納米顆粒及藥物遞送研究
基因編輯與RNA干擾實(shí)驗(yàn)
疫苗載體與免疫研究
臨床及生物制藥工藝開(kāi)發(fā)
下面將對(duì)每個(gè)應(yīng)用領(lǐng)域進(jìn)行詳細(xì)闡述。
電穿孔是實(shí)現(xiàn)外源基因進(jìn)入細(xì)胞的高效手段。Genepulser Xcell 在基因?qū)雽?shí)驗(yàn)中能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)不同細(xì)胞類型的個(gè)性化電場(chǎng)控制:
質(zhì)粒導(dǎo)入:可將外源質(zhì)粒DNA導(dǎo)入細(xì)菌、酵母、哺乳動(dòng)物細(xì)胞中,用于基因表達(dá)與功能分析。
線性DNA或PCR產(chǎn)物導(dǎo)入:適用于突變體構(gòu)建與基因修復(fù)研究。
載體系統(tǒng)導(dǎo)入:用于病毒載體、慢病毒或腺相關(guān)病毒的輔助轉(zhuǎn)染,提升包裝效率。
通過(guò)優(yōu)化電壓與脈沖時(shí)間,可在保證高轉(zhuǎn)化率的同時(shí)減少細(xì)胞損傷,是基因操作實(shí)驗(yàn)中不可替代的設(shè)備。
哺乳動(dòng)物細(xì)胞具有復(fù)雜的膜結(jié)構(gòu),傳統(tǒng)化學(xué)轉(zhuǎn)染(如脂質(zhì)體法)效率低且細(xì)胞損傷較大。Genepulser Xcell 的方波脈沖模式專為此類細(xì)胞設(shè)計(jì),能夠在極短時(shí)間內(nèi)形成穩(wěn)定的電場(chǎng)穿孔效應(yīng)。
應(yīng)用場(chǎng)景包括:
外源基因表達(dá)實(shí)驗(yàn):用于研究特定蛋白質(zhì)的功能或信號(hào)通路調(diào)控。
CRISPR/Cas9 系統(tǒng)導(dǎo)入:實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)基因敲除或編輯。
RNA 干擾實(shí)驗(yàn):siRNA 或 miRNA 的高效遞送。
蛋白質(zhì)表達(dá)優(yōu)化:通過(guò)瞬時(shí)轉(zhuǎn)染實(shí)現(xiàn)短期高水平蛋白表達(dá)。
適用細(xì)胞系包括 HEK293、CHO、HeLa、NIH3T3、Jurkat 等,實(shí)驗(yàn)重復(fù)性高、效率穩(wěn)定。
在微生物分子克隆和基因工程研究中,電穿孔已成為最常用的轉(zhuǎn)化手段之一。Genepulser Xcell 具備高電壓脈沖模式,能有效突破細(xì)菌細(xì)胞壁,尤其適用于難轉(zhuǎn)化菌株。
典型應(yīng)用:
大腸桿菌 DH5α、BL21 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化;
枯草芽孢桿菌和乳酸菌的外源DNA導(dǎo)入;
藍(lán)藻、放線菌等特殊菌株的基因?qū)耄?/p>
基因文庫(kù)構(gòu)建與重組載體篩選。
相較化學(xué)法(CaCl?法),電穿孔效率提升 10~100 倍,且對(duì)環(huán)境敏感度低。
真核微生物如酵母、真菌的細(xì)胞壁較厚,傳統(tǒng)化學(xué)方法難以實(shí)現(xiàn)有效轉(zhuǎn)化。Genepulser Xcell 提供高能量脈沖輸出與多段脈沖模式,能有效破壞細(xì)胞壁屏障而不致細(xì)胞死亡。
主要應(yīng)用包括:
釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)基因工程;
畢赤酵母(Pichia pastoris)重組蛋白表達(dá)系統(tǒng);
曲霉屬、青霉屬工業(yè)菌株改良;
酵母雙雜交與蛋白互作研究。
其高重復(fù)性和低背景污染使其成為真核微生物遺傳操作的理想工具。
植物細(xì)胞壁含纖維素與木質(zhì)素,難以直接進(jìn)行基因?qū)?。Genepulser Xcell 在植物原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化中應(yīng)用廣泛,特別適用于:
轉(zhuǎn)基因植物構(gòu)建:實(shí)現(xiàn)外源基因在植物基因組的穩(wěn)定整合;
植物抗逆性研究:導(dǎo)入應(yīng)激相關(guān)基因分析其功能;
瞬時(shí)表達(dá)系統(tǒng):快速驗(yàn)證外源基因功能。
常用材料包括煙草(Nicotiana)、水稻、水生植物及其他模式植物。通過(guò)優(yōu)化脈沖參數(shù),轉(zhuǎn)化成功率可達(dá) 70% 以上。
Genepulser Xcell 不僅具備電穿孔功能,還支持電融合操作。通過(guò)特定電場(chǎng)組合,可使兩種細(xì)胞膜融合,形成雜交細(xì)胞。
主要應(yīng)用:
雜交瘤細(xì)胞(Hybridoma)制備,用于單克隆抗體生產(chǎn);
植物原生質(zhì)體融合,用于育種改良;
跨種細(xì)胞融合研究,用于細(xì)胞核移植和胚胎研究。
電融合具有控制精確、融合效率高、細(xì)胞損傷小等優(yōu)點(diǎn),是生物制藥領(lǐng)域的重要技術(shù)手段。
隨著納米醫(yī)學(xué)與蛋白質(zhì)工程的發(fā)展,電穿孔技術(shù)也被廣泛應(yīng)用于分子遞送研究。Genepulser Xcell 的多脈沖模式可實(shí)現(xiàn)非遺傳物質(zhì)的高效細(xì)胞內(nèi)導(dǎo)入。
典型應(yīng)用包括:
熒光標(biāo)記蛋白遞送用于細(xì)胞定位研究;
納米顆粒藥物載體遞送以研究細(xì)胞攝取機(jī)制;
抗體、肽類及藥物分子進(jìn)入細(xì)胞用于機(jī)制探討;
細(xì)胞免疫調(diào)控實(shí)驗(yàn)及疫苗佐劑驗(yàn)證。
這種非病毒性遞送方式安全可靠,可廣泛應(yīng)用于基礎(chǔ)研究及臨床前開(kāi)發(fā)。
Genepulser Xcell 在 CRISPR 基因編輯和 RNAi 實(shí)驗(yàn)中具有顯著優(yōu)勢(shì)。其可控脈沖波形能在不損傷細(xì)胞核的前提下高效導(dǎo)入核酸分子。
CRISPR/Cas9 導(dǎo)入:高效遞送 Cas9 mRNA、sgRNA 或質(zhì)粒,適用于多種細(xì)胞系;
RNA 干擾實(shí)驗(yàn):穩(wěn)定導(dǎo)入 siRNA、shRNA,用于基因沉默研究;
基因敲入與修復(fù)研究:聯(lián)合使用供體模板提高同源重組效率。
該技術(shù)在基因治療模型構(gòu)建與細(xì)胞功能分析中具有重要意義。
在免疫學(xué)與疫苗學(xué)領(lǐng)域,Genepulser Xcell 被用于構(gòu)建多種新型疫苗載體。
DNA疫苗開(kāi)發(fā):高效將抗原基因?qū)氩溉閯?dòng)物細(xì)胞或體內(nèi)組織;
病毒載體構(gòu)建:輔助生產(chǎn)腺病毒、慢病毒等重組載體;
樹(shù)突狀細(xì)胞免疫激活:通過(guò)電穿孔導(dǎo)入抗原DNA,增強(qiáng)免疫反應(yīng)。
其高效導(dǎo)入能力與低毒性特點(diǎn),使其成為新型疫苗研發(fā)的重要工具之一。
電穿孔技術(shù)的工業(yè)化應(yīng)用正在快速發(fā)展。Genepulser Xcell 已在生物制藥領(lǐng)域發(fā)揮重要作用:
單克隆抗體工程:用于融合細(xì)胞制備與抗體表達(dá)優(yōu)化;
基因治療載體開(kāi)發(fā):在腺相關(guān)病毒和慢病毒生產(chǎn)中提高轉(zhuǎn)染效率;
細(xì)胞藥物篩選:快速導(dǎo)入調(diào)控基因,評(píng)估藥物反應(yīng);
疫苗批量生產(chǎn):支持規(guī)?;姶┛紫到y(tǒng)擴(kuò)展,適用于工業(yè)級(jí)工藝。
其精確參數(shù)控制與可重復(fù)性能,為臨床研究提供了可靠技術(shù)基礎(chǔ)。
在教學(xué)與基礎(chǔ)科研領(lǐng)域,Genepulser Xcell 也是理想的示范設(shè)備。
可用于生物工程課程中的電轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)教學(xué);
支持多種樣品并行測(cè)試,便于學(xué)生掌握核心原理;
配備數(shù)據(jù)導(dǎo)出系統(tǒng),便于科研論文撰寫(xiě)與實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析。
憑借操作簡(jiǎn)便、參數(shù)直觀和安全可靠的設(shè)計(jì),它成為高等院校和研究所常用的教學(xué)設(shè)備之一。
隨著生物科技的不斷發(fā)展,電穿孔儀的應(yīng)用領(lǐng)域?qū)⑦M(jìn)一步拓展:
精準(zhǔn)醫(yī)療方向:配合基因編輯技術(shù)實(shí)現(xiàn)個(gè)體化治療。
納米生物材料結(jié)合:開(kāi)發(fā)新型電轉(zhuǎn)納米復(fù)合體系。
高通量自動(dòng)化平臺(tái):實(shí)現(xiàn)多樣品自動(dòng)控制與數(shù)據(jù)整合。
生物制藥規(guī)?;a(chǎn):與微流控技術(shù)結(jié)合,提升工業(yè)級(jí)效率。
Genepulser Xcell 憑借成熟技術(shù)與模塊化設(shè)計(jì),為未來(lái)生物產(chǎn)業(yè)的創(chuàng)新發(fā)展提供基礎(chǔ)支撐。
伯樂(lè) Genepulser Xcell 電穿孔儀的應(yīng)用范圍涵蓋從基礎(chǔ)分子生物學(xué)研究到生物制藥工業(yè)生產(chǎn)的多個(gè)領(lǐng)域。
它憑借高精度電場(chǎng)控制、智能操作系統(tǒng)和多樣化脈沖模式,成為連接實(shí)驗(yàn)室科研與產(chǎn)業(yè)應(yīng)用的橋梁。無(wú)論是細(xì)菌質(zhì)粒轉(zhuǎn)化、哺乳動(dòng)物基因編輯,還是蛋白遞送與疫苗開(kāi)發(fā),Genepulser Xcell 都能提供穩(wěn)定、高效、安全的技術(shù)支持。
設(shè)備由長(zhǎng)沙實(shí)了個(gè)驗(yàn)儀器制造有限公司生產(chǎn),提供“三年質(zhì)保、只換不修”的服務(wù)保障,為科研人員與企業(yè)用戶提供長(zhǎng)期可靠的使用體驗(yàn)。憑借強(qiáng)大的功能與廣泛的應(yīng)用價(jià)值,該設(shè)備已成為現(xiàn)代生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)室不可或缺的重要儀器之一。
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