伯樂(lè)(Bio-Rad)Genepulser Xcell 電穿孔儀是一款高性能的電場(chǎng)控制與脈沖釋放系統(tǒng),廣泛應(yīng)用于細(xì)胞轉(zhuǎn)化、質(zhì)粒導(dǎo)入、RNA 干擾以及基因編輯實(shí)驗(yàn)。其核心是精確、可重復(fù)的電場(chǎng)控制系統(tǒng),能夠在極短時(shí)間內(nèi)釋放穩(wěn)定的高壓脈沖,從而實(shí)現(xiàn)細(xì)胞膜瞬時(shí)電穿孔,促進(jìn)外源分子進(jìn)入細(xì)胞。該設(shè)備結(jié)合了數(shù)字化控制、反饋式電路調(diào)節(jié)以及多模式脈沖管理技術(shù),成為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的重要工具。
Genepulser Xcell 的設(shè)計(jì)理念在于實(shí)現(xiàn)“精準(zhǔn)、靈活、安全、高效”的電轉(zhuǎn)化過(guò)程。它不僅提供豐富的參數(shù)調(diào)節(jié)范圍,還具有智能化的電場(chǎng)監(jiān)控功能,使得不同細(xì)胞類型都能在最優(yōu)條件下完成轉(zhuǎn)化。其電場(chǎng)控制系統(tǒng)的穩(wěn)定性與響應(yīng)速度,是決定轉(zhuǎn)化效率與細(xì)胞存活率的關(guān)鍵。
電穿孔是利用高強(qiáng)度瞬時(shí)電場(chǎng)在細(xì)胞膜上形成可逆性微孔,使外源 DNA、RNA 或蛋白質(zhì)等分子穿過(guò)細(xì)胞膜進(jìn)入胞內(nèi)。當(dāng)電場(chǎng)強(qiáng)度足夠大時(shí),細(xì)胞膜兩側(cè)的電勢(shì)差導(dǎo)致脂質(zhì)分子排列發(fā)生變化,形成臨時(shí)通道。電場(chǎng)撤除后,細(xì)胞膜在一定時(shí)間內(nèi)恢復(fù)完整性。此過(guò)程的核心在于脈沖的電壓、時(shí)間和波形的精確控制。
Genepulser Xcell 的電場(chǎng)控制系統(tǒng)主要由以下部分組成:
高壓電源模塊:提供可調(diào)電壓源,輸出范圍廣,能夠滿足細(xì)菌、酵母、哺乳動(dòng)物細(xì)胞等多類型樣品的電轉(zhuǎn)化需求。
電容充放電系統(tǒng):實(shí)現(xiàn)脈沖能量的存儲(chǔ)與瞬時(shí)釋放,確保電壓上升與下降過(guò)程平滑。
控制主板與微處理單元:用于信號(hào)采集、實(shí)時(shí)監(jiān)控、反饋調(diào)節(jié)與參數(shù)記錄。
監(jiān)測(cè)與安全保護(hù)模塊:包括過(guò)流保護(hù)、電弧抑制、溫度傳感及電極狀態(tài)檢測(cè)等。
界面與程序管理系統(tǒng):允許用戶自定義脈沖方案、保存參數(shù)并進(jìn)行重復(fù)實(shí)驗(yàn)。
Genepulser Xcell 的電源模塊采用精密高壓電源設(shè)計(jì),能在毫秒級(jí)時(shí)間內(nèi)輸出穩(wěn)定脈沖。系統(tǒng)支持恒壓、恒場(chǎng)強(qiáng)兩種工作模式,電壓調(diào)節(jié)范圍通常為 10 V 至 2500 V。電源模塊配有高精度采樣電阻與反饋回路,以監(jiān)測(cè)電壓波形的實(shí)時(shí)變化,確保輸出電場(chǎng)的穩(wěn)定性。
電穿孔過(guò)程中,脈沖的能量來(lái)自電容的瞬時(shí)放電。Genepulser Xcell 內(nèi)部配置多組高品質(zhì)電解電容與固態(tài)繼電控制電路。充電階段電容被迅速充至設(shè)定電壓,放電階段通過(guò)放電電路向樣品池瞬時(shí)釋放能量。系統(tǒng)內(nèi)置多級(jí)放電路徑,可根據(jù)不同細(xì)胞類型自動(dòng)調(diào)整放電速率與波形。
核心控制系統(tǒng)由微處理器(Microcontroller Unit)與高速模數(shù)轉(zhuǎn)換器(ADC)構(gòu)成。它實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)電壓、電流與電場(chǎng)變化,通過(guò)閉環(huán)反饋算法修正脈沖輸出誤差。系統(tǒng)每次放電前會(huì)自動(dòng)校準(zhǔn)內(nèi)部基準(zhǔn)電壓,以消除因溫度或電源波動(dòng)造成的誤差。這種反饋式控制使每個(gè)脈沖的波形更加一致,提高實(shí)驗(yàn)可重復(fù)性。
Genepulser Xcell 配套多種電極腔體,如 cuvette 電極與電流檢測(cè)電極。接口采用低電阻鍍金設(shè)計(jì),以減少能量損耗。設(shè)備內(nèi)部布線采用屏蔽結(jié)構(gòu),有效降低電磁干擾,確保脈沖信號(hào)的純凈度。電極溫度檢測(cè)器可實(shí)時(shí)監(jiān)控樣品溫升,避免高能脈沖導(dǎo)致的細(xì)胞損傷。
該系統(tǒng)內(nèi)置數(shù)字存儲(chǔ)單元,可自動(dòng)記錄每次電穿孔的關(guān)鍵參數(shù),包括電壓峰值、脈沖持續(xù)時(shí)間、電流變化曲線等。用戶可通過(guò)液晶顯示屏或外接計(jì)算機(jī)讀取歷史記錄,實(shí)現(xiàn)條件優(yōu)化與溯源管理。部分版本還支持 USB 數(shù)據(jù)導(dǎo)出與軟件聯(lián)機(jī)分析功能。
Genepulser Xcell 的電場(chǎng)控制算法采用閉環(huán)設(shè)計(jì)。系統(tǒng)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)輸出電場(chǎng),并根據(jù)采樣數(shù)據(jù)動(dòng)態(tài)調(diào)整輸出驅(qū)動(dòng)信號(hào),從而消除負(fù)載變化帶來(lái)的偏差。該算法的主要優(yōu)勢(shì)包括:
實(shí)現(xiàn)毫秒級(jí)電壓穩(wěn)定;
降低放電波形畸變;
提高脈沖重復(fù)一致性;
延長(zhǎng)電極使用壽命。
電穿孔效果受波形影響極大。Genepulser Xcell 支持多種脈沖模式:
指數(shù)衰減脈沖:適用于細(xì)菌、酵母等具有堅(jiān)固細(xì)胞壁的樣品;
方波脈沖:用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞和懸浮細(xì)胞;
多脈沖組合模式:通過(guò)間歇釋放多個(gè)低能量脈沖,提高轉(zhuǎn)化率同時(shí)降低細(xì)胞死亡率;
自定義波形模式:研究人員可手動(dòng)設(shè)定電壓、間隔、脈沖數(shù)等參數(shù),實(shí)現(xiàn)針對(duì)性優(yōu)化。
控制系統(tǒng)通過(guò)電流監(jiān)測(cè)反饋可實(shí)時(shí)評(píng)估放電過(guò)程中的能量分布。當(dāng)檢測(cè)到電弧或電阻突變時(shí),系統(tǒng)會(huì)在微秒級(jí)內(nèi)中斷放電,保護(hù)樣品與設(shè)備安全。此動(dòng)態(tài)調(diào)節(jié)功能確保在不同電導(dǎo)率樣品中均能獲得穩(wěn)定可控的電場(chǎng)。
Genepulser Xcell 的核心控制電路經(jīng)過(guò)精密校準(zhǔn),確保在連續(xù)實(shí)驗(yàn)中輸出誤差小于 1%。這種高穩(wěn)定性使其成為標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)的理想設(shè)備,特別適用于大型實(shí)驗(yàn)室或商業(yè)化轉(zhuǎn)化流程。
電場(chǎng)強(qiáng)度、脈沖寬度及電容容量均可靈活調(diào)整,可用于大腸桿菌、酵母、昆蟲(chóng)細(xì)胞、植物原生質(zhì)體以及哺乳動(dòng)物細(xì)胞等多種類型。其可編程特性允許用戶根據(jù)不同細(xì)胞的電導(dǎo)率與膜特性自定義參數(shù)。
系統(tǒng)具備多重保護(hù):當(dāng)檢測(cè)到電極短路、過(guò)熱或電弧放電時(shí),自動(dòng)切斷輸出;電源模塊具有過(guò)壓與過(guò)流保護(hù);同時(shí)支持接地檢測(cè)與電極鎖定設(shè)計(jì),確保操作人員安全。
設(shè)備配備彩色 LCD 屏與菜單式操作界面。參數(shù)設(shè)置直觀明了,系統(tǒng)可自動(dòng)保存常用方案并進(jìn)行快速調(diào)用。部分型號(hào)還支持遠(yuǎn)程監(jiān)控與參數(shù)導(dǎo)出,方便實(shí)驗(yàn)記錄與數(shù)據(jù)分析。
設(shè)備外殼采用高絕緣材料,具備良好抗干擾性能。內(nèi)部散熱設(shè)計(jì)優(yōu)化,確保長(zhǎng)時(shí)間運(yùn)行穩(wěn)定。整機(jī)通過(guò)多項(xiàng)安全認(rèn)證,符合實(shí)驗(yàn)室設(shè)備電磁兼容與生物安全標(biāo)準(zhǔn)。
質(zhì)粒轉(zhuǎn)化與基因?qū)?/strong>
適用于細(xì)菌、酵母及植物細(xì)胞的外源基因?qū)?,提高轉(zhuǎn)化效率,減少細(xì)胞損傷。
RNA 干擾與基因編輯
在 CRISPR/Cas9、siRNA 傳遞等實(shí)驗(yàn)中提供高效載體進(jìn)入通道,尤其適合難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系。
蛋白與納米顆粒導(dǎo)入
對(duì)某些非遺傳性分子,如熒光探針、納米載體的細(xì)胞內(nèi)傳遞同樣具有顯著效果。
電融合與細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)
配合特殊電極可用于細(xì)胞融合及雜交瘤制備,通過(guò)控制脈沖形態(tài)實(shí)現(xiàn)高融合率。
          
          杭州實(shí)了個(gè)驗(yàn)生物科技有限公司