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電穿孔技術(shù)(Electroporation)是一種高效的物理性外源分子導(dǎo)入方法,利用瞬時高電場作用,使細胞膜產(chǎn)生可逆性微孔,從而實現(xiàn) DNA、RNA 或蛋白質(zhì)的導(dǎo)入。該方法在分子生物學(xué)、細胞工程、基因編輯、免疫學(xué)研究及疫苗開發(fā)中應(yīng)用廣泛。
伯樂(Bio-Rad)GenePulser Xcell 電穿孔儀是全球科研實驗室廣泛使用的高性能電穿孔系統(tǒng)。其核心優(yōu)勢在于精確的參數(shù)控制、高度的復(fù)現(xiàn)性、安全的電氣保護設(shè)計及強大的多模式操作功能。本文將從設(shè)備結(jié)構(gòu)、主要性能參數(shù)、電氣特性、應(yīng)用范圍、穩(wěn)定性指標以及對比分析等多個方面,系統(tǒng)介紹 GenePulser Xcell 的技術(shù)性能與應(yīng)用價值。
GenePulser Xcell 系統(tǒng)是一款模塊化高精度電穿孔儀,由主機控制單元、波形控制模塊、電容模塊、電阻模塊、電極槽、安全防護系統(tǒng)及操作顯示屏組成。儀器可輸出兩種主要波形:
指數(shù)衰減波(Exponential Decay Wave)——適用于原核生物、酵母、細菌等;
方波(Square Wave)——適用于哺乳動物細胞和植物原生質(zhì)體。
該系統(tǒng)通過內(nèi)部閉環(huán)反饋電路控制輸出,使電壓、電容及波形穩(wěn)定性達到國際實驗標準。所有放電參數(shù)可實時監(jiān)控、記錄與保存,為實驗復(fù)現(xiàn)性提供可靠保障。
以下為 GenePulser Xcell 電穿孔儀的核心性能參數(shù)匯總與解析。
指數(shù)衰減模式:200–2500 V;
方波模式:10–1000 V;
電壓調(diào)節(jié)精度:±1%;
電壓上升時間:<10 μs;
穩(wěn)定性誤差:≤0.5%。
高電壓輸出適用于不同細胞類型的膜通透性控制,且穩(wěn)定性可確保重復(fù)實驗的一致性。
電容可調(diào)范圍:25–3300 μF;
充電時間:≤5 秒;
容差范圍:±0.5%;
放電時間常數(shù):0.1–99.9 ms。
電容用于儲能并決定脈沖持續(xù)時間。GenePulser Xcell 采用高品質(zhì)薄膜電容組件,耐壓性能強、溫度漂移小,保證長期運行的穩(wěn)定性。
可調(diào)范圍:0–1000 Ω;
分辨率:10 Ω;
功率容限:2 W;
典型使用值:200–400 Ω。
電阻決定電流釋放速度及波形衰減特性。通過精確控制電阻值,儀器可針對不同細胞特性調(diào)節(jié)放電能量,實現(xiàn)最佳轉(zhuǎn)染平衡。
指數(shù)衰減波形(Exponential Decay Wave):電壓隨時間呈指數(shù)下降,用于快速放電;
方波波形(Square Wave):電壓恒定輸出,脈沖時間可調(diào);
波形重復(fù)精度:±0.2 ms;
脈沖寬度范圍:0.05–99.9 ms;
脈沖次數(shù)設(shè)置:1–10 次,可間隔 0.1–1 s;
波形監(jiān)控:內(nèi)置實時顯示系統(tǒng),可導(dǎo)出數(shù)據(jù)。
兩種波形模式可滿足不同類型細胞實驗需求,尤其方波模式在哺乳動物細胞中具有更高存活率與導(dǎo)入效率。
| 電極間距 | 適用電壓范圍 | 典型電場強度(V/cm) | 應(yīng)用對象 |
|---|---|---|---|
| 0.1 cm | 100–1000 | 1×10?–1×10? | 小體積細菌、酵母 |
| 0.2 cm | 500–2500 | 2.5×10?–1.25×10? | 原核細胞標準實驗 |
| 0.4 cm | 100–1000 | 2.5×103–2.5×10? | 哺乳動物細胞 |
| 0.8 cm | 50–400 | 625–5000 | 植物原生質(zhì)體 |
不同電極間距決定電場強度,實驗中需根據(jù)細胞類型合理選擇,以避免電弧放電和細胞損傷。
放電時間范圍:0.1–99.9 ms;
能量釋放精度:±2%;
脈沖間隔控制范圍:0.1–10 s;
多脈沖模式下時間差誤差:<1%。
該儀器采用微處理器控制系統(tǒng),可對能量釋放曲線進行實時補償,防止過沖和電場不均。
推薦樣品體積:50–100 μL;
適用電導(dǎo)率范圍:0.1–10 mS/cm;
最佳緩沖液:低離子強度介質(zhì)(如 10% 甘油或?qū)S?electroporation buffer)。
高電導(dǎo)率溶液易引起電弧放電,因此建議使用低鹽體系。
顯示方式:高清液晶屏(LCD);
操作方式:旋鈕+觸控按鍵;
顯示內(nèi)容:電壓、電容、電阻、波形曲線、能量輸出;
數(shù)據(jù)存儲:可保存 99 組實驗參數(shù);
接口類型:USB 輸出,可導(dǎo)出實驗數(shù)據(jù)。
直觀的界面和可編程操作模式使得用戶可以快速調(diào)用標準參數(shù),實現(xiàn)實驗自動化管理。
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