伯樂電穿孔儀 165-2661 是一種基于高壓脈沖電場原理的高性能生物電轉(zhuǎn)化設(shè)備。
通過在極短時(shí)間內(nèi)施加高壓電場,該儀器可在細(xì)胞膜上產(chǎn)生可逆性微孔,使 DNA、RNA、蛋白質(zhì)、藥物或納米載體等外源分子順利進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部。
165-2661 具有操作精準(zhǔn)、波形穩(wěn)定、能量可調(diào)和數(shù)據(jù)可重復(fù)等特點(diǎn),廣泛應(yīng)用于科研、醫(yī)學(xué)、農(nóng)業(yè)及生物制藥等多個(gè)領(lǐng)域。
它不僅是實(shí)驗(yàn)室中常規(guī)的基因?qū)牍ぞ?,也是?xì)胞工程與基因治療研究的重要支撐設(shè)備。
電穿孔技術(shù)的核心在于電場作用下細(xì)胞膜通透性的瞬時(shí)改變。
伯樂 165-2661 通過可控高壓脈沖,使細(xì)胞膜形成短暫微孔,在孔關(guān)閉前外源分子進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞核,從而實(shí)現(xiàn)基因?qū)牖蛭镔|(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)。
主要技術(shù)特征包括:
高精度電壓控制(10–3500 V 可調(diào));
電容范圍寬(25–3275 μF),適配多種細(xì)胞類型;
支持指數(shù)衰減波與方波兩種放電模式;
多脈沖程序設(shè)計(jì),滿足不同細(xì)胞膜修復(fù)特性;
具備溫控散熱與安全防護(hù)系統(tǒng),保障實(shí)驗(yàn)穩(wěn)定性。
憑借這些特性,165-2661 在細(xì)胞導(dǎo)入效率、存活率及可重復(fù)性方面均表現(xiàn)優(yōu)異。
165-2661 的應(yīng)用范圍涵蓋了生命科學(xué)多個(gè)層面,主要包括:
分子生物學(xué)研究 —— DNA/RNA 導(dǎo)入、質(zhì)粒克隆與基因編輯;
細(xì)胞生物學(xué)與轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn) —— 真核細(xì)胞轉(zhuǎn)染與蛋白表達(dá);
微生物工程 —— 細(xì)菌、酵母及放線菌的遺傳改造;
植物生物技術(shù) —— 原生質(zhì)體電穿孔與植物基因?qū)耄?/span>
醫(yī)學(xué)研究 —— 基因治療、細(xì)胞免疫療法及藥物遞送;
生物制藥與疫苗開發(fā) —— 基因載體構(gòu)建與表達(dá)體系優(yōu)化;
材料與納米生物學(xué) —— 納米粒子、電荷分子及藥物遞送研究。
以下將對各領(lǐng)域的典型應(yīng)用進(jìn)行詳細(xì)闡述。
伯樂電穿孔儀是細(xì)菌基因克隆實(shí)驗(yàn)中的關(guān)鍵工具。
傳統(tǒng)化學(xué)法(如 CaCl? 法)效率有限,而電穿孔技術(shù)可在極短時(shí)間內(nèi)實(shí)現(xiàn)高效率質(zhì)粒導(dǎo)入。
應(yīng)用示例:
使用 0.2 cm 電擊杯,2000 V、25 μF 條件下可獲得 10?–10? CFU/μg DNA 的轉(zhuǎn)化效率;
適用于常見宿主菌株如 E. coli DH5α、JM109、BL21 等。
其高效率與重復(fù)性,使 165-2661 成為克隆載體構(gòu)建與重組蛋白表達(dá)實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)設(shè)備。
在 CRISPR/Cas9、TALEN 或 ZFN 等基因編輯體系中,電穿孔被廣泛用于將編輯載體導(dǎo)入靶細(xì)胞或微生物。
165-2661 可實(shí)現(xiàn)高轉(zhuǎn)導(dǎo)率且不依賴病毒載體,尤其適用于對安全性要求高的研究項(xiàng)目。
電穿孔對 RNA、siRNA、miRNA 及核酸修飾體具有較高的導(dǎo)入效率。
可應(yīng)用于基因沉默、轉(zhuǎn)錄調(diào)控及非編碼 RNA 功能研究。
伯樂 165-2661 的方波模式特別適用于真核細(xì)胞,具有溫和、穩(wěn)定、細(xì)胞損傷小等優(yōu)點(diǎn)。
適用于多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞,如:
CHO、HEK293、BHK、HeLa、NIH3T3;
T 細(xì)胞、B 細(xì)胞等懸浮系細(xì)胞。
應(yīng)用場景:
外源基因表達(dá)驗(yàn)證;
熒光蛋白標(biāo)記實(shí)驗(yàn);
蛋白定位與信號(hào)通路分析;
轉(zhuǎn)染穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建。
在優(yōu)化電壓(約 550–700 V)、電容(500–800 μF)條件下,轉(zhuǎn)染效率可超過 80%,細(xì)胞存活率達(dá) 85% 以上。
電穿孔可直接將 DNA/mRNA 疫苗導(dǎo)入宿主細(xì)胞,誘導(dǎo)抗原表達(dá),廣泛應(yīng)用于新型疫苗研發(fā)。
同時(shí)在蛋白表達(dá)體系中,可快速建立瞬時(shí)高表達(dá)平臺(tái),提高實(shí)驗(yàn)效率。
165-2661 可對多種細(xì)菌進(jìn)行高效轉(zhuǎn)化,包括:
大腸桿菌(E. coli);
枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis);
乳酸菌與放線菌。
通過調(diào)整電場強(qiáng)度(8–12 kV/cm),可實(shí)現(xiàn)質(zhì)?;蚧蚱蔚母咝?dǎo)入。
電穿孔技術(shù)特別適用于高鹽環(huán)境耐受性低、難以化學(xué)轉(zhuǎn)化的菌株。
電穿孔在酵母(Saccharomyces cerevisiae)和真菌(如 Aspergillus niger)基因轉(zhuǎn)化中應(yīng)用廣泛。
相較化學(xué)轉(zhuǎn)化法,其導(dǎo)入率更高,且不受細(xì)胞壁厚度影響。
典型參數(shù):1400 V、500 μF、τ=6–8 ms,可獲得穩(wěn)定的轉(zhuǎn)化效率與細(xì)胞活性。
165-2661 也被用于工業(yè)發(fā)酵菌株改造,如氨基酸、維生素和酶制劑生產(chǎn)。
通過導(dǎo)入關(guān)鍵代謝通路基因,可實(shí)現(xiàn)菌株代謝重構(gòu)與高產(chǎn)優(yōu)化。
在植物科學(xué)研究中,電穿孔被用于將外源基因或 RNA 導(dǎo)入植物原生質(zhì)體中,適用于:
擬南芥、水稻、小麥、煙草、玉米等;
轉(zhuǎn)基因育種早期驗(yàn)證與功能分析。
常用條件為:0.4 cm 電擊杯、600–800 V、1000 μF 方波,時(shí)間常數(shù)約 8–9 ms。
通過電穿孔,可在數(shù)小時(shí)內(nèi)實(shí)現(xiàn)目標(biāo)基因在植物細(xì)胞中的表達(dá),用于:
蛋白定位實(shí)驗(yàn);
啟動(dòng)子活性驗(yàn)證;
信號(hào)通路響應(yīng)研究。
電穿孔技術(shù)也可用于植物病原體轉(zhuǎn)化(如真菌、藻類、細(xì)菌),以研究植物—病原互作機(jī)制。
165-2661 不僅用于基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn),也在醫(yī)學(xué)研究中發(fā)揮重要作用。
電穿孔是將治療性基因、核酸或藥物導(dǎo)入患者細(xì)胞的重要方法之一。
在 CAR-T 細(xì)胞制備中,電穿孔用于導(dǎo)入嵌合抗原受體基因,是替代病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)的高安全性方案。
優(yōu)勢:
無病毒載體風(fēng)險(xiǎn);
可控參數(shù),適配多種細(xì)胞類型;
成本低、效率高。
電穿孔可暫時(shí)增加組織細(xì)胞通透性,促進(jìn)化療藥物進(jìn)入細(xì)胞,提高治療效率。
已在皮膚癌、黑色素瘤及局部腫瘤治療中驗(yàn)證有效。
在 DNA 或 mRNA 疫苗開發(fā)中,165-2661 可用于細(xì)胞系表達(dá)檢測、抗原篩選及遞送系統(tǒng)研究。
伯樂電穿孔儀在工業(yè)化生物技術(shù)中具有廣泛用途:
重組蛋白生產(chǎn)
通過高效導(dǎo)入表達(dá)載體,可快速建立生產(chǎn)菌株;
抗體藥物開發(fā)
在 CHO 細(xì)胞中轉(zhuǎn)染抗體基因,用于候選藥物篩選;
疫苗與病毒載體構(gòu)建
提供穩(wěn)定可控的載體構(gòu)建與宿主表達(dá)體系;
發(fā)酵工程
結(jié)合基因?qū)肱c代謝通路優(yōu)化,實(shí)現(xiàn)工業(yè)菌株性能提升。
165-2661 的高重復(fù)性保證了大規(guī)模實(shí)驗(yàn)中數(shù)據(jù)一致性,為生物制藥產(chǎn)業(yè)提供標(biāo)準(zhǔn)化工具。
在納米醫(yī)學(xué)與生物材料研究中,電穿孔技術(shù)被用于研究納米粒子、藥物分子及載體系統(tǒng)的細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制。
應(yīng)用包括:
納米載藥系統(tǒng)的細(xì)胞遞送實(shí)驗(yàn);
蛋白與肽類復(fù)合物的導(dǎo)入驗(yàn)證;
電場誘導(dǎo)細(xì)胞膜修復(fù)與分子動(dòng)力學(xué)研究。
165-2661 的精確脈沖控制可用于探究電場作用下的膜電生理特性,為細(xì)胞力學(xué)和材料科學(xué)研究提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
伯樂電穿孔儀 165-2661 因其操作直觀、安全可靠,常被用于高校與科研機(jī)構(gòu)的教學(xué)與培訓(xùn)。
教學(xué)用途包括:
演示電穿孔原理與細(xì)胞膜電學(xué)特性;
指導(dǎo)學(xué)生進(jìn)行基因?qū)雽?shí)驗(yàn);
訓(xùn)練科研人員掌握電擊參數(shù)優(yōu)化與數(shù)據(jù)分析。
其友好的操作界面與穩(wěn)定性能,使得學(xué)生能在有限時(shí)間內(nèi)獲得清晰、可重復(fù)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
隨著生物與工程學(xué)的融合,電穿孔技術(shù)在新興領(lǐng)域中展現(xiàn)出更廣闊的應(yīng)用潛力:
合成生物學(xué)
實(shí)現(xiàn)人工基因線路、代謝路徑構(gòu)建;
生物信息工程
結(jié)合電信號(hào)監(jiān)測與細(xì)胞行為分析;
環(huán)境與生態(tài)研究
電轉(zhuǎn)化微生物用于污染治理或資源回收;
組織工程
促進(jìn)基因載體在干細(xì)胞中的導(dǎo)入,為再生醫(yī)學(xué)提供基礎(chǔ)。
| 領(lǐng)域 | 實(shí)驗(yàn)體系 | 電擊參數(shù) | 主要結(jié)果 | 
|---|---|---|---|
| 分子克隆 | E. coli | 2000 V, 25 μF | 高轉(zhuǎn)化率 10? CFU/μg DNA | 
| 酵母轉(zhuǎn)化 | S. cerevisiae | 1400 V, 500 μF | 穩(wěn)定表達(dá)外源蛋白 | 
| 動(dòng)物細(xì)胞轉(zhuǎn)染 | CHO 細(xì)胞 | 600 V, 500 μF, 3 脈沖 | 表達(dá)率 80%,活性高 | 
| 植物原生質(zhì)體 | 煙草 | 650 V, 1000 μF | GFP 瞬時(shí)表達(dá)良好 | 
| 基因治療 | T 細(xì)胞 | 300 V, 方波 | CAR-T 構(gòu)建成功 | 
| 藥物遞送 | 黑色素瘤模型 | 800 V/cm | 提高藥物進(jìn)入效率 10 倍以上 | 
伯樂電穿孔儀 165-2661 的應(yīng)用優(yōu)勢主要體現(xiàn)在:
廣泛的適用范圍 —— 覆蓋從微生物到動(dòng)物細(xì)胞;
高重復(fù)性 —— 精確的電壓與時(shí)間常數(shù)控制;
靈活參數(shù)調(diào)節(jié) —— 可根據(jù)細(xì)胞特性定制電場條件;
安全性高 —— 自動(dòng)放電與過壓保護(hù)系統(tǒng);
數(shù)據(jù)智能化 —— 自動(dòng)記錄實(shí)驗(yàn)參數(shù)與結(jié)果;
兼容性強(qiáng) —— 適配多種電擊杯與外接模塊。
這些性能使得該儀器在科研與產(chǎn)業(yè)中均具有長期應(yīng)用價(jià)值。
          
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