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質保3年只換不修，廠家長沙實了個驗儀器制造有限公司

一、儀器概述

伯樂電穿孔儀 165-2661 是伯樂公司為生物電轉化實驗設計的高精度電擊系統(tǒng)。
它通過控制高壓脈沖電場，使細胞膜暫時形成微孔，促使 DNA、RNA、蛋白質或其他外源分子進入細胞內部，從而實現(xiàn)細胞轉化、基因導入、分子遞送等操作。

該設備適用于細菌、酵母、植物原生質體、動物細胞以及真核單細胞系統(tǒng)，是現(xiàn)代分子生物學實驗室的標準裝備之一。
165-2661 集成了高壓脈沖控制、能量管理、安全防護、數(shù)據(jù)記錄和自動校準等多種功能，操作簡便，性能穩(wěn)定，重復性優(yōu)良。

二、主要技術參數(shù)

三、儀器組成

165-2661 主要由以下五部分組成：

1. 主機模塊：
   含高壓變壓器、電容儲能組、放電控制電路與信號采集單元，是能量轉換與輸出的核心。

2. ShockPod 電擊槽：
   電極觸點區(qū)，用于放置電擊杯。內部采用高導電金屬材料，外層聚碳酸酯絕緣保護，耐壓高、散熱好。

3. 控制顯示界面：
   高亮液晶屏配合旋鈕與按鍵，可進行電壓、電容、波形、次數(shù)、間隔等參數(shù)設置。

4. 安全防護系統(tǒng)：
   包含蓋鎖檢測、自動放電回路、溫度監(jiān)控、過壓限流等功能，確保操作安全。

5. 數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)：
   自動記錄每次實驗的電壓、電容、時間常數(shù)及能量釋放率，支持 USB 導出與日志回溯。

四、開機與準備

1. 環(huán)境要求

• 室溫 20–25 ℃，濕度 ≤70%；

• 臺面平穩(wěn)、干燥、絕緣；

• 避免陽光直射與高頻干擾源；

• 實驗區(qū)保持通風。

2. 檢查步驟

1. 電源線與接地線連接牢固；

2. ShockPod 內部干燥無殘液；

3. 電擊杯潔凈無裂紋；

4. 控制面板無異物阻礙；

5. 打開電源，系統(tǒng)自檢顯示 “SELF TEST PASSED”。

如出現(xiàn)錯誤代碼或報警聲，按提示檢查蓋鎖、電源或電容狀態(tài)。

五、樣品準備

1. 細胞狀態(tài)

• 使用對數(shù)生長期細胞；

• 細菌濃度約 1×10? cells/mL，動物細胞 10?–10? cells/mL；

• 酵母與原生質體濃度適當調低。

2. 緩沖液要求

• 導電率低于 1.5 mS/cm；

• 常用配方：10% 甘露醇或蔗糖 + 1 mM HEPES；

• pH 7.0–7.4，需過濾除菌。

3. 外源分子

• DNA / RNA / 蛋白質應純度高、無鹽；

• 每次使用前預冷至 4 ℃。

4. 預冷操作

• 樣品與電擊杯置冰上預冷 10 分鐘，減少熱損傷。

5. 裝樣

• 將樣品吸入電擊杯約 70–80% 容積，避免氣泡；

• 擦拭外壁，防止液體外溢造成電弧。

六、參數(shù)設置

1. 進入設置菜單

按 “MENU” 鍵進入?yún)?shù)設定界面，可選擇：

• Manual Setup（手動模式）

• Preset Protocol（預設方案）

2. 主要參數(shù)設置

3. 參數(shù)保存

設置完成后按 “SAVE” 并輸入方案名稱，例如 “Ecoli-2000V-25uF”。
系統(tǒng)會自動存儲，便于重復實驗調用。

七、操作流程

1. 裝載電擊杯

• 將樣品裝好的電擊杯放入 ShockPod 槽內；

• 壓下蓋子直至聽到“咔噠”聲；

• 屏幕顯示 “LID CLOSED”。

2. 放電操作

1. 按 “PULSE” 鍵進入充電；

2. 顯示 “CHARGING…”；

3. 達到設定電壓后顯示 “READY TO PULSE”；

4. 按 “ENTER” 觸發(fā)放電；

5. 屏幕顯示放電電壓、時間常數(shù)與能量釋放；

6. 放電結束后自動提示 “COMPLETE”。

3. 放電后處理

• 等待 10 秒確保電場完全釋放；

• 打開蓋子取出電擊杯；

• 將樣品立即加入恢復培養(yǎng)液中進行后續(xù)培養(yǎng)。

八、樣品恢復

恢復階段有助于細胞膜孔道修復與基因表達啟動。

九、數(shù)據(jù)記錄與導出

165-2661 自動保存以下實驗信息：

• 電壓、電容、時間常數(shù)；

• 實際波形與能量釋放百分比；

• 實驗時間、編號、溫度。

數(shù)據(jù)導出方法：

1. 插入 USB 設備；

2. 菜單選擇 “Data → Export”；

3. 選擇單次或全部記錄；

4. 生成 .csv 文件，可用 Excel 打開分析。

十、安全操作注意事項

1. 確認蓋鎖閉合，未閉合禁止放電；

2. 禁止在設備通電狀態(tài)下觸摸電極；

3. 樣品不得含高鹽或導電雜質；

4. 放電結束后至少等待 10 秒再取樣；

5. 每次實驗間隔 ≥10 秒，防止電容過熱；

6. 實驗區(qū)應保持干燥，禁止液體濺出；

7. 若發(fā)現(xiàn)閃光、異味、異常噪聲，應立即斷電；

8. 設備維修僅限專業(yè)技術人員進行。

十一、常見問題及處理

十二、實驗優(yōu)化建議

1. 控制導電率：確保緩沖液電導率 ≤ 1.5 mS/cm。

2. 優(yōu)化電場強度：起始電壓使用推薦值的 80%，逐步調整。

3. 防止熱損傷：樣品、電擊杯及 ShockPod 均應預冷。

4. 合理設定 τ 值：細菌約 4–5 ms，哺乳動物細胞約 7–8 ms。

5. 多脈沖優(yōu)化：對難轉染體系可設 2–3 次脈沖，間隔 1 s。

6. 數(shù)據(jù)記錄：保存 τ 與轉化效率對照表，為后續(xù)實驗積累參數(shù)。

十三、清理與維護

1. 日常清理

• 關閉電源并等待自動放電完成；

• 用無水乙醇擦拭 ShockPod 和電擊杯外壁；

• 確保所有部件干燥后存放。

2. 定期維護

3. 儲存條件

• 環(huán)境溫度 10–35 ℃；

• 濕度 ≤70%；

• 遠離腐蝕性氣體與強磁場；

• 長期停用時斷開電源并覆蓋防塵罩。

十四、性能測試與校準

1. 電壓輸出測試

使用標準高壓探頭測定輸出電壓，應與設定值差 ≤ ±2%。

2. 時間常數(shù)驗證

在標準負載下放電，測得 τ 值偏差 ≤ ±0.05 ms。

3. 能量釋放率檢測

通過系統(tǒng)自動計算，釋放率應 ≥ 90%。

如超出范圍，請執(zhí)行系統(tǒng)“Auto-Calibration” 自動校準功能。

十五、系統(tǒng)運行邏輯

1. 初始化：上電后自檢電源、電容、溫度與蓋鎖狀態(tài)；

2. 設定參數(shù)：用戶輸入或調用預設方案；

3. 充電階段：電容充至目標電壓；

4. 放電階段：脈沖能量釋放至樣品；

5. 數(shù)據(jù)采集：系統(tǒng)實時監(jiān)測電壓、電流、τ 值；

6. 反饋記錄：計算能量釋放率，保存實驗數(shù)據(jù)；

7. 安全放電：自動釋放殘余電壓，提示“Safe to Open”。

十六、使用注意要點

• 每次實驗前清理電極觸點；

• 不同樣品需使用不同規(guī)格電擊杯；

• 放電頻率不宜過高，防止電容積熱；

• 對高鹽樣品必須進行離子置換；

• 建議定期更新實驗參數(shù)數(shù)據(jù)庫；

• 若長期未使用，應先空載測試后再進行實驗。

十七、應用領域概述

165-2661 可廣泛應用于：

1. 細菌質粒轉化與克隆實驗；

2. 酵母及真核單細胞轉化；

3. 動物細胞基因轉染與藥物遞送；

4. 植物原生質體基因導入；

5. 納米載體、電穿孔藥物研究；

6. 疫苗及蛋白表達體系構建。

其高精度參數(shù)控制和可重復放電特性，使其成為科研級與生產級實驗的理想工具。

十八、優(yōu)勢總結

1. 高精度控制 —— 電壓與時間常數(shù)誤差極低；

2. 雙波形選擇 —— 兼顧不同細胞體系；

3. 自動安全防護 —— 多重聯(lián)鎖設計；

4. 數(shù)據(jù)追溯功能 —— 實驗記錄自動保存；

5. 模塊化維護 —— 拆裝便捷、易于保養(yǎng)；

6. 穩(wěn)定可靠性 —— 連續(xù)放電上千次性能不衰減。

十九、標準化操作流程簡表