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質(zhì)保3年只換不修，廠家長沙實了個驗儀器制造有限公司。
Bio-Rad GenePulser Xcell 電穿孔儀是一款高性能的基因?qū)胂到y(tǒng)，能夠在短時間內(nèi)對細(xì)胞施加強(qiáng)電場，使細(xì)胞膜暫時形成可滲透通道，讓 DNA、RNA 或蛋白質(zhì)等外源分子進(jìn)入細(xì)胞。該系統(tǒng)模塊化設(shè)計靈活，操作簡便，廣泛應(yīng)用于哺乳動物細(xì)胞、細(xì)菌、酵母、真菌以及植物原生質(zhì)體的電轉(zhuǎn)化實驗中。
設(shè)備配備主機(jī)單元、ShockPod 電擊腔、CE 電容擴(kuò)展模塊和 PC 電阻控制模塊，可實現(xiàn)不同波形（指數(shù)衰減波和方波）輸出，滿足多種實驗需求。儀器具備精準(zhǔn)電壓控制、電弧保護(hù)和數(shù)據(jù)存儲功能，確保實驗的重復(fù)性與安全性。
為了幫助操作者高效掌握 GenePulser Xcell 的使用方法，以下對實驗全過程進(jìn)行詳細(xì)說明，包括實驗準(zhǔn)備、參數(shù)設(shè)定、電擊操作、樣品恢復(fù)及數(shù)據(jù)記錄等步驟。
在實驗前，確認(rèn)主機(jī)、電擊腔和模塊連接穩(wěn)固。檢查高壓線纜是否老化，確保接地良好。儀器應(yīng)置于平穩(wěn)干燥的實驗臺上，避免靠近水源或電磁干擾設(shè)備。
通電前確認(rèn)電源電壓與儀器額定電壓一致，開機(jī)后待系統(tǒng)自檢完成方可操作。
準(zhǔn)備新鮮健康的細(xì)胞樣品、無菌比色皿（0.1、0.2 或 0.4 cm 間隙）、低導(dǎo)電電穿孔緩沖液、移液槍與無菌槍頭。
質(zhì)?；蚝怂針悠窇?yīng)純度高、無鹽離子殘留。實驗前將所有液體與比色皿預(yù)冷至 4 ℃，以減輕電擊造成的熱損傷。
細(xì)胞的生理狀態(tài)決定電穿孔效果。
哺乳動物細(xì)胞：選擇對數(shù)生長期的貼壁或懸浮細(xì)胞，轉(zhuǎn)入前以 1×PBS 洗滌兩次，去除血清離子。濃度控制在 5×10?–1×10? 個/mL。
細(xì)菌：使用電感受態(tài)細(xì)胞，OD??? 在 0.5–0.7 之間，洗滌后懸浮于無鹽緩沖液。
酵母或真菌：用低離子緩沖液清洗數(shù)次以去除培養(yǎng)基殘留。
根據(jù)細(xì)胞類型選擇合適間隙：
0.1 cm：適用于細(xì)菌；
0.2 cm：適用于酵母；
0.4 cm：適用于哺乳動物細(xì)胞。
加入樣品時要緩慢注入，避免氣泡產(chǎn)生。氣泡是電弧的主要誘因，可能導(dǎo)致樣品燒毀。
插上電源，打開主機(jī)。系統(tǒng)自檢完成后進(jìn)入主界面。確認(rèn) ShockPod 蓋子關(guān)閉良好，顯示屏顯示 “Ready” 狀態(tài)。
GenePulser Xcell 提供三種操作模式：
手動模式（Manual）：適合自定義實驗參數(shù)。
預(yù)設(shè)程序模式（Preset Protocol）：內(nèi)置多種細(xì)胞類型參數(shù)，可快速調(diào)用。
用戶程序模式（User Protocol）：可儲存常用參數(shù)供重復(fù)實驗使用。
選擇相應(yīng)模式后，確認(rèn)連接的模塊類型，如 CE 模塊或 PC 模塊，以便系統(tǒng)正確識別控制參數(shù)。
不同模式下的參數(shù)略有差別，但核心包括以下幾項：
決定電場強(qiáng)度。E=V/d，其中 d 為比色皿間隙。
哺乳動物細(xì)胞一般設(shè)置在 100–300 V，細(xì)菌可達(dá) 1800–2500 V。
應(yīng)根據(jù)細(xì)胞耐受性逐步優(yōu)化，避免一次設(shè)置過高。
在指數(shù)衰減波模式中，電容控制放電能量和持續(xù)時間。
低電容（25–125 μF）產(chǎn)生短脈沖，適合細(xì)菌；高電容（500–1000 μF）產(chǎn)生長脈沖，適用于真核細(xì)胞。
時間常數(shù) τ=RC，可直接顯示在儀器結(jié)果界面。
方波模式下設(shè)定脈沖時間（0.05–100 ms）與次數(shù)（1–10 次）。
難轉(zhuǎn)染細(xì)胞可適度增加脈沖數(shù)或時間，但應(yīng)注意存活率。
多脈沖間需設(shè)定間隔 0.1–10 s。時間過短會導(dǎo)致細(xì)胞尚未恢復(fù)再次受擊而死亡。
若使用 PC 模塊，可增加并聯(lián)電阻（50–1000 Ω）穩(wěn)定輸出。樣品電阻過低時必須調(diào)整以防短路。
準(zhǔn)備好的細(xì)胞懸液與核酸混合均勻后，吸入比色皿中。
每次加入體積應(yīng)略小于比色皿容量（如 0.4 cm 比色皿加樣 250 μL 左右）。
輕輕敲擊比色皿壁使氣泡浮出并移除。
將比色皿放入電擊腔底部凹槽，確保電極端完全接觸金屬接點(diǎn)。蓋緊 ShockPod 上蓋。
檢查顯示屏上參數(shù)無誤后，按下 “Pulse” 按鈕。系統(tǒng)發(fā)出提示音后立即執(zhí)行電擊。
電擊時間通常為幾毫秒到幾十毫秒，結(jié)束后儀器顯示實際電壓、電流及時間常數(shù)。
電擊期間禁止觸摸儀器及樣品。若出現(xiàn)異常響聲或放電閃光，應(yīng)立即停止操作。
電擊結(jié)束后，等待顯示屏恢復(fù) “Ready” 狀態(tài)，再打開 ShockPod 蓋子。
取出比色皿，迅速將樣品轉(zhuǎn)入預(yù)冷復(fù)蘇液或培養(yǎng)基中。
電擊后細(xì)胞膜短暫開放，應(yīng)立即處理以促進(jìn)修復(fù)。
電擊后立即加入適量含血清培養(yǎng)基，靜置 5–10 分鐘以恢復(fù)膜完整性，再轉(zhuǎn)入培養(yǎng)皿培養(yǎng)。
過早離心或更換培養(yǎng)基會增加死亡率。
加入 800 μL 復(fù)蘇液（SOC 或 SOB），在 37 ℃ 振蕩 1 小時以表達(dá)抗性基因。
隨后可用于涂板篩選。
電擊后將細(xì)胞轉(zhuǎn)入富含營養(yǎng)的復(fù)蘇培養(yǎng)基中，30 ℃ 下靜置 1–2 小時，再進(jìn)行篩選或培養(yǎng)。
電擊結(jié)束后，儀器自動顯示輸出電壓、時間常數(shù)、電流峰值等信息。
這些數(shù)據(jù)反映了放電過程的真實情況，應(yīng)記錄保存以便優(yōu)化實驗。
GenePulser Xcell 可自動保存最近 100 次實驗記錄。
建議定期導(dǎo)出數(shù)據(jù)至電腦或記錄本中，包括：
實驗日期
樣品類型
電壓、電容、電阻、時間常數(shù)
實際電流與脈沖圖形
轉(zhuǎn)染效率與存活率評價
通過多次實驗比較不同條件下的結(jié)果，繪制電壓—轉(zhuǎn)染率或時間—存活率曲線。
選擇兼顧高效率與高存活的參數(shù)作為標(biāo)準(zhǔn)條件。
儀器最高輸出達(dá) 3,000 V。操作時應(yīng)保證手部干燥，不得觸碰電擊腔。
僅在 ShockPod 蓋子關(guān)閉時方可電擊，嚴(yán)禁裸露比色皿通電。
確保樣品中無氣泡、電極清潔、比色皿無裂紋。
緩沖液導(dǎo)電性適中，不含高濃度鹽。實驗前樣品充分冷卻可降低風(fēng)險。
所有耗材必須無菌處理。操作臺表面用 70% 乙醇擦拭，防止交叉污染。
實驗后廢液需按生物危害廢棄物處理。
出現(xiàn)電弧或火花：
可能因氣泡、電極臟、樣品導(dǎo)電性過高。應(yīng)重新制備樣品、清潔比色皿或降低鹽濃度。
轉(zhuǎn)染效率低：
可能電場強(qiáng)度不足或電擊時間太短。適度提高電壓或延長脈沖。
細(xì)胞死亡率高：
電壓過高或多脈沖間隔過短。應(yīng)減小電場強(qiáng)度或增加間隔時間。
無電擊反應(yīng)：
可能比色皿未接觸接點(diǎn)或模塊未識別。檢查 ShockPod 安裝與模塊連接。
結(jié)果重復(fù)性差：
樣品電阻波動大、溫度不穩(wěn)定或緩沖液濃度不一致。建議統(tǒng)一制備體系并保持低溫操作。
關(guān)閉電源并拔掉插頭。
用軟布蘸去離子水清潔機(jī)身與電擊腔表面。避免液體流入插口。
使用后立即用去離子水沖洗比色皿，晾干保存。若電極發(fā)黑可用無水乙醇輕擦。
嚴(yán)禁使用酸性溶液清洗，以防腐蝕。
每月檢查一次 CE 與 PC 模塊接口是否牢固。長期使用后建議半年進(jìn)行一次全面校準(zhǔn)。
若發(fā)現(xiàn)輸出電壓偏差或電流異常，應(yīng)停止使用并聯(lián)系廠家檢測。
實驗完成后，應(yīng)及時整理數(shù)據(jù)并撰寫實驗報告，內(nèi)容包括：
細(xì)胞類型與批次
樣品電阻與電導(dǎo)率
各參數(shù)設(shè)定值與實際輸出值
轉(zhuǎn)染效率統(tǒng)計結(jié)果
異常現(xiàn)象與原因分析
后續(xù)改進(jìn)建議
標(biāo)準(zhǔn)化的數(shù)據(jù)記錄有助于提高實驗可重復(fù)性，也能在不同批次間實現(xiàn)條件比對。
GenePulser Xcell 電穿孔儀由長沙實了個驗儀器制造有限公司生產(chǎn)，整機(jī)質(zhì)保三年，實行“只換不修”的服務(wù)政策。
使用過程中若出現(xiàn)非人為損壞的性能故障，廠家提供免費(fèi)更換設(shè)備。所有配件均符合國家計量與安全標(biāo)準(zhǔn)。
用戶在購買后應(yīng)妥善保存合格證與發(fā)票，以便質(zhì)保期內(nèi)享受換機(jī)服務(wù)。
GenePulser Xcell 電穿孔儀實驗流程從樣品準(zhǔn)備到電擊操作，每一步都影響最終結(jié)果。成功的關(guān)鍵在于：
嚴(yán)格控制細(xì)胞狀態(tài)與緩沖體系；
消除氣泡與電弧隱患；
精確設(shè)定電壓、電容、時間常數(shù)等參數(shù)；
保證安全操作與充分復(fù)蘇；
規(guī)范記錄、分析與維護(hù)。
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